時(shí)間:2023-01-21 12:03:22
開篇:寫作不僅是一種記錄,更是一種創(chuàng)造,它讓我們能夠捕捉那些稍縱即逝的靈感,將它們永久地定格在紙上。下面是小編精心整理的12篇玉米須的藥用價(jià)值,希望這些內(nèi)容能成為您創(chuàng)作過(guò)程中的良師益友,陪伴您不斷探索和進(jìn)步。
關(guān)鍵詞 玉米須;玉米須總皂苷;降糖;開發(fā)利用
中圖分類號(hào) R965;R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739(2012)01-0160-01
玉米須(Corn Silk)是禾本科農(nóng)作物玉米(Zea Mays)的雌花干燥花柱和柱頭,一般于玉米收獲季節(jié)變褐并干枯時(shí)采集。玉米須具有相當(dāng)重要的植物生理生化功能,其在玉米的生長(zhǎng)過(guò)程中作為傳粉受精的通道。玉米須具有一定的藥用與保健價(jià)值,其性平、味甘,是中醫(yī)常用的利尿消腫的中藥,開發(fā)前景廣闊。
近年來(lái),糖尿?。―M)患病率的逐年升高,醫(yī)藥專家一直致力于尋找高效、低毒的降糖藥物。其以可延緩并發(fā)癥、作用溫和持久、具有綜合治療作用、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)而受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的重視。我國(guó)民間有利用玉米須降低血糖的偏方,近年來(lái)的藥理試驗(yàn)及臨床應(yīng)用均表明玉米須水煎劑能降低膽固醇血癥小鼠血清膽固醇水平,能夠預(yù)防和治療糖尿病及并發(fā)癥,降糖效果良好。
1 玉米須降糖的主要成分
近年來(lái),對(duì)降糖成分的篩選及其作用機(jī)理的研究是中藥研究的熱點(diǎn)之一,研究表明皂苷、萜類、多糖、生物堿、黃酮等多種化學(xué)結(jié)構(gòu)類型均具有降糖作用,如印苦楝葉、黃芪多糖、人參皂苷、大豆皂苷、苦瓜皂苷提取物中的黃酮苷等有較好的降糖作用[1]。
現(xiàn)代研究認(rèn)為玉米須的化學(xué)成分主要包括單糖、多糖類、甾醇類、黃酮類、烷烴類等,有降血糖、止血、利尿、平肝、利膽、降血壓等功效[2]。玉米須的發(fā)酵制劑有明顯的降血糖作用,能夠明顯降低葡萄糖、腎上腺素引起的高血糖。玉米須提取物皂苷能顯著或明顯降低腎上腺素、四氧嘧啶所致的高血糖,諸多研究表明玉米須總皂苷是玉米須降糖有效活性部位。小劑量玉米須總皂苷組可明顯降低血糖,大劑量玉米須總皂苷組和達(dá)美康組能顯著降低血糖,大劑量玉米須多糖組有降糖趨勢(shì);玉米須總皂苷對(duì)防治腎上腺素所致的血糖升高效果較好。對(duì)玉米須中的多糖類成分進(jìn)行研究表明,不同成熟期、不同產(chǎn)地玉米須中多糖的含量有所差異,一般為0.43%~0.92%,以成熟期玉米須中多糖含量最高,認(rèn)為其多糖類成分可能與降糖作用有關(guān)[3]。
2 玉米須降糖效果
研究發(fā)現(xiàn),采用玉米須水煎劑30 g/kg連續(xù)灌喂小鼠7 d,患有四氧嘧啶糖尿病及外源性葡萄糖引起的血糖升高小鼠的血糖含量明顯下降,還能減弱腎上腺素(240 μg/kg)的升糖作用。此外,有研究表明玉米須中提取的粗多糖精品能夠預(yù)防由四氧嘧啶引起的小鼠高血糖,正常及糖尿病小鼠灌喂量為100 mg/kg和400 mg/kg時(shí),均表現(xiàn)為血糖下降[4-5]。
有研究表明,復(fù)方糖尿凈和玉米須水煎劑對(duì)由于四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的降糖效果明顯,對(duì)腎上腺素、葡萄糖導(dǎo)致的高血糖小鼠有降糖效果,對(duì)正常小鼠的血糖無(wú)影響。玉米須水提物對(duì)于由鏈脲佐菌素所導(dǎo)致的小鼠糖尿病也有較好的治療效果。此外,玉米須發(fā)酵制劑能夠顯著降低家兔體內(nèi)的血糖含量[6-7]。
3 玉米須內(nèi)皂苷的提取和分離方法
玉米須內(nèi)皂苷的提取和分離方法見圖1。
4 結(jié)語(yǔ)
玉米須總皂苷和多糖均有一定降糖作用,總皂苷效果優(yōu)于多糖,兩者使用劑量不同導(dǎo)致其降血糖的效果存在差異。玉米在我國(guó)廣泛種植,玉米須資源極為豐富,其降糖效果好,因此提取玉米須內(nèi)的降糖成分制備降糖藥物具有廣闊的前景[8]。
5 參考文獻(xiàn)
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預(yù)防疾病
“正氣存內(nèi),邪不可干”,這是中醫(yī)的著名論斷,就是說(shuō)只要人體氣血調(diào)和,便可以使外邪無(wú)法侵襲機(jī)體,從而保持健康;反之,正氣不足,氣血失調(diào),邪氣必然乘虛而入,導(dǎo)致疾病發(fā)生。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,不少疾病的發(fā)生,往往是由于某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的缺乏導(dǎo)致了機(jī)體平衡的失調(diào)。果品食療就是通過(guò)補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)素,從整體上增強(qiáng)機(jī)體的抵抗力,從而達(dá)到預(yù)防疾病的目的。比如番茄,它的維生素A含量較高,可預(yù)防夜盲癥;桃子含鐵量居水果之首,可用于預(yù)防缺鐵性貧血等等。
有些瓜果對(duì)某些疾病具有特異性的預(yù)防作用。例如:西瓜是清熱解暑佳品,又名“天生白虎湯”,盛夏季節(jié)常吃西瓜,對(duì)中暑具有良好的預(yù)防作用;烏梅內(nèi)服,有清湯、退熱、抑菌作用,可用來(lái)預(yù)防急性腸道傳染病;金橘含有豐富的維生素C和金橘苷,這兩種物質(zhì)能增強(qiáng)人體對(duì)嚴(yán)寒侵襲的防御能力,經(jīng)常食用,不但可預(yù)防感冒,而且對(duì)防止血管脆性增加和破裂亦有一定作用。
治療疾病
果品食療的使用范圍十分廣泛,可用于臨床各科病癥的輔助治療。例如:羅漢果飲料,它具有清熱、化痰、止咳作用,對(duì)急、慢性支氣管炎效果明顯sghgrcy皮玉米須湯,其中西瓜皮有較好的利尿作用,可治高血壓??;甘蔗生姜汁,能和胃、健逆、止嘔,對(duì)急性胃炎伴嘔吐者療效頗葚蓯蓉湯,用桑葚養(yǎng)血潤(rùn)腸,蓯蓉溫腎通便,芝麻潤(rùn)腸通便,枳殼理氣,共奏養(yǎng)血溫腎、潤(rùn)腸通便的功效,適用于老年或體弱者的便秘;花生燉豬腳具有益氣、養(yǎng)血、通乳作用,是民間治療產(chǎn)后乳汁不通或缺乳的驗(yàn)方;核桃燉蠶蛹,能通經(jīng)脈、潤(rùn)血脈、烏須發(fā),使皮膚細(xì)嫩光滑,達(dá)到養(yǎng)生美容的作用等等。
此外,有些瓜果外用的療效也十分顯著,如西瓜霜治咽喉痛、石榴皮外敷治小兒濕疹等等。
養(yǎng)生美容
人體都有一個(gè)生長(zhǎng)和衰老的過(guò)程,如何保持青春常在,防止衰老過(guò)早出現(xiàn)呢?注意攝取那些對(duì)人體生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),保持良好的消化功能,這兩個(gè)方面是十分重要的。
(1)瓜果類食物皆含有豐富的水分、纖維素、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)酸、維生素、礦物質(zhì)和植物蛋白等,它們能使人體攝取豐富而全面的營(yíng)養(yǎng)素;其中有機(jī)酸和纖維素還具有刺激胃液、促進(jìn)腸道蠕動(dòng)的作用,有助于消化和排泄。
(2)瓜果具有益氣養(yǎng)血、滋陰生津、健脾和中、補(bǔ)腎柔肝等作用,既能用于身體虛弱的調(diào)養(yǎng),也是年老體弱、產(chǎn)后體虛、先天不足者很好的滋補(bǔ)品。例如蓮子能養(yǎng)心、補(bǔ)腎、健脾,胡桃有補(bǔ)腎固精作用,蘋果可潤(rùn)肺生當(dāng),大棗具有被 脾健胃、益氣生當(dāng)功能,葡萄能補(bǔ)氣血、強(qiáng)筋骨,桑葚具有補(bǔ)肝、益腎、養(yǎng)血的作用等等。
【摘要】 目的優(yōu)化葉中總黃酮的提取工藝,考察葉總黃酮抗氧化活性。方法采用L9 (34 ) 正交實(shí)驗(yàn), 考察浸提劑濃度、料液比、浸提時(shí)間和溫度等影響因素;研究D-101大孔吸附樹脂分離富集葉提取液中總黃酮;參照Fenton反應(yīng)原理研究葉總黃酮的清除·OH中作用。結(jié)果葉總黃酮的最佳提取工藝為:40 %乙醇溶液為提取溶劑,采用料液比1∶20 ( m∶V) ,在60 ℃下浸提2.5 h;D-101大孔吸附樹脂能較好分離富集葉黃酮類物質(zhì);葉中總黃酮對(duì)Fenton體系產(chǎn)生的·OH有較好的清除作用。結(jié)論該研究為葉中有效成分的綜合利用提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】 葉; 總黃酮; 提取; 正交實(shí)驗(yàn); 清除自由基
葉,是菊科(Compsitae) 植物腦 Dendranthema nankingense的干燥嫩莖葉。葉為江蘇地產(chǎn)藥材,味苦、辛,性涼,具有清熱解毒,疏風(fēng)平肝之功能,主治風(fēng)火赤眼、鼻炎、咽喉腫痛、支氣管炎、瘡癤腫痛等。葉含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪、纖維素、礦物質(zhì)、鹽等,其中維生素A 和礦物質(zhì)含量最為突出,另含有具防癌作用的黃酮類和具特殊香味的揮發(fā)油芳香物質(zhì)。由于其含有特殊的營(yíng)養(yǎng)成分,食用可清熱解毒、開胃健脾,對(duì)防治流感、流腦、肝炎、痢疾有非常好的作用[1]。現(xiàn)代研究表明,黃酮類化合物是葉乙醇提取液中含量較多的有效成分,因其具有顯著的清除人體內(nèi)自由基、抗老化、抗突變、調(diào)血脂、降血壓等藥理保健功能,是一類極具開發(fā)前景的天然有機(jī)抗氧化劑[2]。目前主要運(yùn)用乙醇-水溶劑提取、堿性稀醇提取、超聲波和超臨界流體萃取等方法對(duì)藥用植物中黃酮類化合物進(jìn)行提取[3],然后采用大孔吸附樹脂對(duì)黃酮類化合物進(jìn)行分離富集[4],最后利用Fenton反應(yīng)等多種自由基產(chǎn)生體系研究其抗氧化能力[5]。近年來(lái)有關(guān)葉中活性成分——黃酮類物質(zhì)的研究報(bào)道較少,為此本實(shí)驗(yàn)以葉為研究對(duì)象,考察了溶劑濃度、料液比、浸提時(shí)間和溫度等因素對(duì)葉中黃酮類物質(zhì)提取的影響,并采用正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行工藝條件優(yōu)化,用D101大孔吸附樹脂對(duì)葉黃酮提取液進(jìn)行富集,最后還研究了葉黃酮對(duì)Fenton體系產(chǎn)生的·OH的清除作用,為證明其藥用價(jià)值提供科學(xué)依據(jù)。
1 材料
1.1 儀器BS124型電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司);HD型恒溫水浴鍋(上海分析儀器廠);SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司);UV-9100紫外/可見分光光度計(jì)(北京瑞利分析儀器有限公司);高速FW80型萬(wàn)能粉碎機(jī)(天津華鑫儀器廠)。
1.2 試劑95%乙醇、三氯甲烷、鹽酸、水楊酸、氫氧化鈉、硝酸鋁、過(guò)氧化氫(南京化學(xué)試劑有限公司);石油醚(無(wú)錫市亞盛化工有限公司);醋酸乙酯(上海凌峰化學(xué)試劑有限公司);丙酮(上海實(shí)驗(yàn)試劑有限公司);七水合硫酸亞鐵(廣東·汕頭市西隴化工廠)。以上試劑均為分析純,實(shí)驗(yàn)用水為去離子水。分別將試劑配成如下使用液:氫氧化鈉溶液(質(zhì)量分?jǐn)?shù) 4%);硝酸鋁溶液(質(zhì)量分?jǐn)?shù) 10%);亞硝酸鈉溶液(質(zhì)量分?jǐn)?shù) 5%);乙醇(體積分?jǐn)?shù) 95%、70%、40% );硫酸亞鐵溶液(3.0 mmol/L);過(guò)氧化氫溶液(2.5 mmol/L);水楊酸-乙醇溶液(3.0 mmol/L)。
1.3 材料將市售葉置于65 ℃的恒溫干燥箱中干燥48 h后粉碎,過(guò)80目篩,儲(chǔ)存?zhèn)溆?蘆丁(生化試劑,純度為95% 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);D101大孔吸附樹脂(天津市南開大學(xué)化工廠)。
2 方法
2.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品23.20 mg,置于100 ml容量瓶中,加入適量70%乙醇溶液,置于溫水中加熱使溶解,再用70%乙醇溶液定容,搖勻,即得220.4 μg/ml的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液。精密移取標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.05,0.10,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00,7.00 ml于25 ml容量瓶中,分別加入5%亞硝酸鈉溶液1.00 ml,搖勻放置6 min,加入10%硝酸鋁溶液1.00 ml,搖勻放置6 min,加入4%氫氧化鈉溶液10.00 ml,加去離子水定容至刻度,搖勻放置15 min,在500 nm處測(cè)吸光度,以溶劑作空白,去離子水作參比,重復(fù)測(cè)量3次,取其平均值,繪制曲線可得吸光度A與蘆丁濃度C (μg/ml)的線性回歸方程[6](如下圖1所示):A = 0.011 6C + 0.004 9,r= 0.999 6,說(shuō)明蘆丁濃度C在0.44~61.71 μg/ml濃度范圍內(nèi)與吸光度A之間有較好的線性關(guān)系。圖1 線性關(guān)系
2.2 葉總黃酮提取及測(cè)定影響葉中總黃酮提取的因素主要有提取劑乙醇濃度、樣品質(zhì)量與乙醇體積比(料液比)、浸提時(shí)間和溫度等[3,7]。選擇L9(34)正交表研究浸漬法提取葉總黃酮的最佳工藝條件。實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)確稱取1.50 g葉粉末和規(guī)定量的乙醇溶液置于裝有回流裝置的圓底燒瓶中,按照L9(34)正交表進(jìn)行提取實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,過(guò)濾得總黃酮濾液,取其濾液在500 nm處測(cè)定吸光度,然后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程即可計(jì)算出樣品中總黃酮的浸出量(mg/g)。
2.3 葉總黃酮的提純研究黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中常常連接有酚羥基、甲氧基、甲基和黃酮苷元等官能團(tuán),大多數(shù)黃酮苷元宜用極性較小的溶劑,如用氯仿、乙醚、丙酮、醋酸乙酯等萃取,而對(duì)多甲基黃酮的游離苷元甚至可用苯進(jìn)行萃取[8]。利用黃酮類化合物與混入的雜質(zhì)極性不同,選用不同溶劑進(jìn)行萃取可達(dá)到精制富集的目的。實(shí)驗(yàn)中先回收葉總黃酮提取液的乙醇得到總黃酮的水溶液,再用3 BV石油醚處理直到石油醚萃取液顯無(wú)色為止,以便除去脂肪酸等脂溶性成分,然后選用多個(gè)溶劑系統(tǒng)分別對(duì)上述提取液進(jìn)行多次處理,以萃取率(計(jì)算公式如下)為指標(biāo),考察不同萃取溶劑系統(tǒng)對(duì)總黃酮萃取效果的影響,從而選擇出最佳的萃取溶劑系統(tǒng)。萃取率(*)=m樣品-m對(duì)照m0×100%①式中:m樣品(μg)為經(jīng)折算后的萃取液中的總黃酮質(zhì)量;m對(duì)照(μg)為萃取液中的非黃酮經(jīng)折算成總黃酮的質(zhì)量; m0(μg)為加入葉處理液中總黃酮的質(zhì)量。大孔樹脂吸附分離技術(shù)是20 世紀(jì)60 年展起來(lái)的一種固液柱層析分離技術(shù),具有價(jià)廉、吸附容量大、可反復(fù)使用等優(yōu)點(diǎn),因此在天然產(chǎn)物有效成分特別是黃酮類化合物的精制純化中已被廣泛應(yīng)用,而且呈良好的發(fā)展趨勢(shì)[9]。本實(shí)驗(yàn)利用D-101大孔吸附樹脂對(duì)葉總黃酮進(jìn)行精制純化[10],洗脫劑乙醇濃度為70%,吸附速度為2 ml/min,乙醇用量為4倍柱體積,分步收集洗脫液(0.5 倍柱體積/管),測(cè)出各管洗脫液中總黃酮的含量,繪制總黃酮的洗脫曲線。
2.4 清除羥自由基研究參照Fenton反應(yīng)原理及李貴榮[11]的方法改進(jìn)后進(jìn)行測(cè)定。利用H2O2與Fe2+混合產(chǎn)出·OH,但由于·OH具有很高的反應(yīng)活性,存活時(shí)間短,若在反應(yīng)體系中加入水楊酸,就能有效地捕捉·OH,并產(chǎn)生有色物質(zhì)。反應(yīng)如下:H2O2+ Fe2+Fe3++·OH+OH-·OH此產(chǎn)物在508 nm處有強(qiáng)吸收,若在此反應(yīng)體系中加入具有清除·OH功能的被測(cè)物,便會(huì)與水楊酸競(jìng)爭(zhēng)·OH,從而使有色物質(zhì)生產(chǎn)量減少。將配制好3.0 mmol/L硫酸亞鐵溶液、2.5 mmol/L過(guò)氧化氫溶液、3.0 mmol/L水楊酸-乙醇溶液、一定濃度的樣品提取液,按下表1的順序依次加入到25 ml的比色管中,加去離子水至刻度,振蕩?kù)o置10 min后,以去離子水為參比,于508 nm處測(cè)吸光度值,代入公式計(jì)算清除率。見表1。其計(jì)算公式如下:清除率(%)=[A對(duì)照-(A樣品-A0)]/A對(duì)照×100%式中:A對(duì)照為沒(méi)有加樣品的吸光值;A樣品為加樣品的吸光值;A0為沒(méi)有加顯色劑的吸光值。
3 結(jié)果與討論
3.1 葉總黃酮提取工藝的優(yōu)化影響葉總黃酮提取的主要因素有提取劑乙醇濃度、樣品質(zhì)量與乙醇體積比(料液比)、浸提溫度和反應(yīng)時(shí)間等,本實(shí)驗(yàn)采用表2所示的正交實(shí)驗(yàn)因素水平表,通過(guò)正交篩選法選出最佳的實(shí)驗(yàn)條件,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。
上述實(shí)驗(yàn)所用正交表除各因子外,由于無(wú)空白列做對(duì)照,所以采用常規(guī)方法,由正交表中極差項(xiàng)可知因素B和因素D的R值非常接近,因此將均方中B和D項(xiàng)均近似作為誤差項(xiàng),但在實(shí)際中以B項(xiàng)來(lái)計(jì)算各因素的F值和P值進(jìn)行顯著性判斷。從表4方差分析結(jié)果表明,在95%置信水平下,從葉提取總黃酮的工藝參數(shù)中,A因素和C因素影響高度顯著,B和D因素影響可忽略。綜合極差分析和方差分析可知上述4種影響因素的主次順序?yàn)椋篈>C>B>D。葉總黃酮提取的最佳浸提條件是A3B2C1D2,即以40%乙醇為提取溶劑,采用料液比1∶20(m∶V),在60 ℃下提取2.5 h,測(cè)定吸光度,得到葉總黃酮單位浸出量為72.485 4 mg/g。表1 ·OH實(shí)驗(yàn)加樣表表2 正交因素水平表表3 L9(34)正交實(shí)驗(yàn)與結(jié)果表4 方差分析表
3.2 葉總黃酮的提純
3.2.1 葉總黃酮的萃取提純分別使用醋酸乙酯、氯仿和氯仿-醋酸乙酯(1∶1)3種溶劑系統(tǒng)對(duì)葉總黃酮水溶液進(jìn)行連續(xù)萃取,以3次累積萃取率為指標(biāo)確定最佳萃取溶劑系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表5所示,從表中可以看出3種溶劑系統(tǒng)的葉總黃酮的累積萃取率都不高,可能的原因是葉中黃酮類物質(zhì)的極性比較大,而實(shí)驗(yàn)所用的3種溶劑系統(tǒng)中只有醋酸乙酯極性中等,其他溶劑系統(tǒng)極性比較小,由相似相溶原理可知葉總黃酮在這些溶劑系統(tǒng)中的溶解性較差。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,采用醋酸乙酯作為萃取溶劑時(shí),葉總黃酮的累積萃取率最高可達(dá)17.26%。
3.2.2 葉總黃酮的柱色譜提純大孔吸附樹脂預(yù)處理:取適量D-101大孔吸附樹脂用3 BV無(wú)水乙醇浸泡24 h,傾倒上層乙醇,然后裝入玻璃層析柱,用無(wú)水乙醇以2B V/h的流速通過(guò)樹脂層,至流出液加去離子水不呈渾濁為止,并用去離子水以相同的流速?zèng)_洗樹脂層至流出液沒(méi)有醇味為止;然后用2 BV 5%稀鹽酸溶液以2 ml/ min 流速通過(guò)樹脂層,并浸泡1 h后用去離子水以相同的流速?zèng)_洗樹脂層至流出液pH值為中性;最后用2 BV 4%氫氧化鈉溶液以2 ml/min 流速通過(guò)樹脂層,并浸泡1 h后用去離子水以相同的流速?zèng)_洗樹脂層至流出液pH值為中性。表5 不同萃取系統(tǒng)對(duì)葉黃酮水溶液的累積萃取效果
將“3.2.1”節(jié)中醋酸乙酯總黃酮萃取液4.00 ml(經(jīng)測(cè)定,總黃酮濃度為202.8 μg/ml)拌適量預(yù)處理過(guò)的大孔吸附樹脂,揮干再采用濕法裝柱干法上樣。以洗脫液體積(BV)為橫坐標(biāo),單位洗脫量(μg/BV)和累積洗脫量(μg),做室溫下70%乙醇分離提純總黃酮的洗脫曲線如圖2所示。圖2 葉總黃酮的洗脫曲線由單位洗脫量曲線可以看出,當(dāng)洗脫液體積1 BV時(shí),單位洗脫量隨著洗脫液的增加而遞減;而當(dāng)洗脫體積為3.5 BV時(shí)總黃酮基本被洗脫下來(lái)。由累積洗脫量曲線可以看出,當(dāng)洗脫液體積1.5 BV時(shí),隨著洗脫液增加,累積洗脫量增加緩慢;當(dāng)洗脫液體積為3.5 BV時(shí)幾乎達(dá)到洗脫極限,此時(shí)總黃酮的累積洗脫率為102.2%。
3.3 清除羥自由基研究結(jié)果將“3.2.2”節(jié)中經(jīng)D-101大孔吸附樹脂分離富集的葉總黃酮提取液進(jìn)行清除羥自由基研究,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下圖3所示。從圖3中可以看出,葉總黃酮提取液對(duì)由Fenton 體系產(chǎn)生的·OH 有一定的清除作用,隨著溶液中總黃酮含量的增加,總黃酮對(duì)·OH 的清除能力也逐漸增強(qiáng)。當(dāng)樣品溶液中總黃酮濃度
4 結(jié)論
本實(shí)驗(yàn)通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)的研究,確定了葉中總黃酮的的最優(yōu)提取工藝條件,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明葉中總黃酮的最佳提取工藝:即以40%乙醇為提取溶劑,采用料液比1∶20(m∶V),在60 ℃下提取2.5 h。此法方法簡(jiǎn)便、快速,適用于規(guī)?;纳a(chǎn)。實(shí)驗(yàn)考察了多種不同溶劑系統(tǒng)對(duì)葉總黃酮水溶液進(jìn)行萃取測(cè)定,結(jié)果表明使用醋酸乙酯溶劑系統(tǒng)萃取3次,總黃酮的萃取率可達(dá)17.26%,使用D101大孔吸附樹脂對(duì)醋酸乙酯總黃酮萃取液進(jìn)行分離提純,實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)了明顯的洗脫峰,當(dāng)洗脫體積為3.5 BV時(shí)黃酮類物質(zhì)基本被洗脫下來(lái),此時(shí)洗脫率為102.2%。此外還探討了葉中總黃酮對(duì)Fenton體系產(chǎn)生的·OH有較好的清除作用,為證明葉的藥用價(jià)值提供了科學(xué)依據(jù)。
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