時間:2023-05-30 09:25:30
開篇:寫作不僅是一種記錄,更是一種創造,它讓我們能夠捕捉那些稍縱即逝的靈感,將它們永久地定格在紙上。下面是小編精心整理的12篇鹿茸的作用,希望這些內容能成為您創作過程中的良師益友,陪伴您不斷探索和進步。
【摘要】文章探討了鹿茸多肽對β淀粉樣蛋白誘導脊髓神經元細胞凋亡的保護作用。
【主題詞】鹿茸多肽作用分析
脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是外科常見的創傷,其年發病率逐年升高。在脊髓損傷中,除了原發的物理打擊因素造成神經細胞損傷外,已發現損傷區及臨近部位的神經細胞存在遲發性的死亡現象,這種死亡與常見的壞死不同,表現為一種程序性死亡(細胞凋亡),細胞凋亡可能參與了脊髓損傷的病理生理過程。caspase3是凋亡過程中最重要的蛋白酶,降低其的表達有助于脊髓損傷的修復和再生。鹿茸系鹿科動物梅花鹿或馬鹿的雄鹿未骨化密生絨毛的幼角。關于鹿茸多肽混合物,近兩年,有學者通過實驗證明鹿茸多肽對脊髓損傷后的神經細胞有保護作用,本實驗應用鹿茸多肽作用于β淀粉樣蛋白誘導的脊髓神經元細胞凋亡的保護作用,以進一步闡述其對脊髓神經細胞保護作用的機理。
一 實驗材料
15d孕鼠購自吉林大學實驗動物中心;DMEM培養基、胎牛血清、胰蛋白酶購自invitrogen公司;細胞培養瓶和培養板購自Castar公司;神經生長因子(NGF)購自Sigma公司;鹿茸多肽由長春中醫藥大學惠贈;β淀粉樣蛋白(Aβ25-35)、四甲基偶氮唑鹽(MTT)、二甲基亞砜(DMSO)購自(Sigma公司);兔多克隆caspase3抗體購自北京中杉金橋生物技術有限公司。
二 實驗方法
1 凝聚態Aβ25-35的制備用超純水將凍干的Aβ25-35溶解配成100 μmol/L的儲存液,于-20℃ 保存,使用前配成所需濃度,于37℃孵育24 h備用。
2 胎鼠脊髓細胞懸液制備及培養取孕15d大鼠,10%水合氯醛腹腔麻醉后,無菌狀態下取出胎鼠。用Hank’s液沖洗數遍后,放于培養皿中。在解剖顯微鏡下從背側完全暴露腦干以下整條脊髓,從正中溝處用鎢絲針切除雙側脊髓的后外側部。將取下的脊髓腹側組織,經Hank’s液沖洗后,剝去表面的血管等,用顯微剪子細剪切成糜狀,越細越好;然后用0.25%胰酶37℃消化20min后,用吸管輕輕吹打數次,經200目濾網過濾,離心棄上清,用含15%胎牛血清培養基以1×106/ml接種于塑料培養瓶中。
將細胞培養在含15%胎牛血清、100U/ml氨芐青霉素及100U/ml鏈霉素的DMEM培養基中,于37℃、飽和濕度、5 %CO2濃度下培養,2~3d 換液一次。實驗均取對數生長期細胞,實驗前12 h細胞換用無血清培養液,觀察不同濃度Aβ25-35的作用。
3 MTT比色法檢測細胞活力觀察不同終濃度(0、5、10、20、25、30μmol/L)的Aβ25-35作用24 h后,細胞活力的變化,細胞接種于96孔板24 h后加入不同濃度的Aβ25-35作用24 h,每個濃度設4個復孔L,同時設與實驗孔平行的空白對照,最后比色時以對照孔調零。共同孵育24 h后更換培養基,每孔加入180μl的培養基和20μl的MTT(5 mg/ml),置37℃、5%CO2培養箱培養4 h,棄培養液,每孔加入200μl DMSO,37℃孵育30 min,至結晶物充分溶解。在多功能酶標儀上測定570nm的吸光度(D570),其與對照吸光度的比值作為相對細胞活力。
4 流式細胞儀檢測將細胞接種于24孔板,待達到80%融合時,按下列分組進行實驗:A.對照組,B. Aβ25-35(25μmol/L),C. Aβ25-35(25μmol/L)+鹿茸多肽(400mg/ml)[3],D.照射Aβ25-35(25μmol/l)+NGF(20ng/ml)組。各組均6復孔。將24h以后各組細胞用0.25%胰蛋白酶消化,1000 r/min 離心5min,棄上清;用500μl 5mmol/L EDTA/0.01mol/L PBS洗滌細胞;再加入50μl 10g/L RNaseA,室溫下孵育30min;最后加入500μl 100mg/LPI染色液,旋轉混勻,置4℃避光孵育30min后,流式細胞儀測定。
5 免疫細胞化學染色將1cm×lcm蓋玻片經浸酸及消毒等處理后,放入24孔培養板中,加入10倍稀釋的多聚賴氨酸液,置于CO2 孵箱中1h;棄去多聚賴氨酸液,用DMEM培養基洗一次,將各組細胞懸液分別接種于各孔,繼續培養24h;棄去原培養液,用37℃預熱的0.1mol/L PBS輕洗3次;余按免疫組織化學試劑盒說明操作。
三 統計方法
應用統計分析軟件SPSS14.0分析數據,數據以均數±標準差(x±s)表示,兩兩比較采用t檢驗,P
四 結果
1 脊髓神經元細胞的培養及鑒定單細胞懸液接種后第2d,細胞聚集成團狀,第3d出現大量懸浮的neurosphere(約30~60個細胞),而且neurosphere越來越多。到第7d細胞胞體十分飽滿,輪廓清晰,有的細胞可見明顯的鳥眼狀細胞核,也有的細胞伸出樹枝狀突起,突起相互連成網絡。用神經元特異烯醇化酶(NSE)標記神經元。鏡下觀察,可見實驗組細胞胞體飽滿,突起明顯并連成網狀。
2 流式細胞儀檢測結果以400mg/ml劑量觀察鹿茸多肽對Aβ25-35誘導脊髓細胞凋亡的抑制作用,并用NGF作為對照。結果顯示,Aβ(25μmol/L)+鹿茸多肽(400mg/ml)組細胞凋亡百分數是19.35±6.74與Aβ組凋亡百分數37.42±12.55比較,有顯著性差異,P
3 免疫組化檢測caspase3結果caspase3陽性細胞胞質著棕色。結果顯示:對照組無caspase3陽性染色的細胞;Aβ(25μmol/L)+鹿茸多肽(400mg/ml)組caspase3陽性細胞數減少,比單純Aβ(25μmol/L)組少,其作用與NGF陽性對照組比較無差異,鹿茸多肽對脊髓細胞凋亡具有抑制作用。
五 討論
脊髓損傷的治療是神經科學領域內一道尚未解決的難題,雖然人們采取了許多種方法促進損傷后的脊髓軸突再生修復,但存在許多限制因素,很難達到理想效果,許多學者進行了深入研究脊髓神經組織損傷后再生不良,其重要原因是傷后繼發性損害不斷加重所致,而細胞凋亡是繼發性損傷的關鍵,抑制細胞凋亡是阻止或減少繼發性損傷,保護神經功能的治療所在。
在春節期間,李先生接連收到兩份親朋好友送來的鹿茸。他常聽人說,鹿茸是一種很好的補藥,如果使用得當,可起到溫補腎陽、延年益壽的作用。但他在使用鹿茸進補時也感到有些為難:自己的體質是否適合吃鹿茸,怎樣吃鹿茸才能取得理想的補養效果呢?
鹿茸是梅花鹿或馬鹿還沒有骨化的幼角,有“補陽第一藥”的盛譽。中醫認為,鹿茸是大熱滋補之品,具有補氣養血、消除疲勞、補精髓、助腎陽、強筋健骨、延年益壽的功效,適合有體質虛弱、未老先衰、畏寒、手足發涼、胃脘冷痛等虛寒癥狀的人服用,尤其適合腎虛者服用。臨床研究發現,鹿茸中含有25種氨基酸和多種維生素,具有增強免疫力、造血功能及促進創傷愈合的作用。有報道稱,鹿茸還有很好的提升白細胞和紅細胞水平的作用。因此,貧血患者及在進行放療或化療后血象較低的癌癥患者可吃一些鹿茸進行調治。下面就介紹4種使用鹿茸進補的方法:
將鹿茸、人參和肉類食物一起煲成肉湯食用
這種使用鹿茸進補的方法最為常見,效果很不錯。鹿茸肉湯的制作方法是:取鹿茸片5~10克,雞肉(或鴨肉、鵝肉、鴿肉、羊肉)120克,紅參(或高麗參)12克,食鹽、味精等調味料各少許。將上述原料一起放入電飯煲或沙鍋內加適量的清水燉煮3~5個小時,調入食鹽、味精即成,可隨意服用。
將鹿茸制成鹿茸茶服用
研究發現,將鹿茸制成鹿茸茶服用,其所含的藥物成分能夠迅速、完全地被人體吸收。鹿茸茶的制作方法是:將0.5~1克的鹿茸片放入水杯中,用適量的開水沖泡后服用(鹿茸片也應嚼食服下),可隔日服1次。鹿茸茶具有較好溫補腎陽的作用,腎陽偏虛者堅持服用此茶數月必有助益。
將鹿茸和粳米一起煮粥服用
取鹿茸片(或鹿茸粉)0.5~1克,粳米適量。將粳米入鍋加適量的清水熬煮至爛熟,調入鹿茸片再煮片刻即成,可每日服1次。
將鹿茸制成鹿茸酒服用
對于喜歡飲酒的人來說,將鹿茸制成藥酒服用是非常適宜的。制作鹿茸酒應采用冷浸法,具體的做法是:將30~印克的鹿茸和500~1000毫升的白酒一起放入瓷瓶中,置于陰涼處密封保存,每隔2~3天晃動一下酒瓶,連續浸泡半個月即成,可每次飲用10~20毫升。酒量不大的人,也可將少量的此藥酒兌入等量的白開水中稀釋后飲用。待此藥酒全部飲完后,可在瓷瓶中添加1000毫升的白酒,將剩下的鹿茸渣再浸泡半個月后飲用。
需要注意的是,沒有陽虛癥狀的年輕人若使用鹿茸進補,可能會出現全身燥熱、鼻出血、口干唇裂、口舌生瘡等不良反應。有五心煩熱、口干、口苦、咽喉干燥或干痛、大便干燥、小便黃赤、目赤、易怒、女性月經量多、血色鮮紅、舌紅、脈細等癥狀者或患有高血壓、糖尿病、感冒、肝腎功能不全、胃炎及消化性潰瘍者不宜服用鹿茸進補。
[關鍵詞]鹿茸;活性成分;鹿茸多肽;鹿茸多胺
中圖分類號:G154.56 文獻標識碼:A 文章編號:1009-914X(2015)25-0397-01
對于鹿茸來說,人們并不是十分陌生,多數的研究人員都對其化學成分以及藥理作用等方面進行深入研究,并且取得了一定的成績。在實際的研究工作中可以看出,其化學成分比較多,除了氨基酸類和脂肪酸之外,還有相應的含氮類化合物等等。所以說,經過提煉之后可以有效的改進人體的心血管疾病,增強身體的免疫力。另外,鹿茸的藥理活性也值得研究,在深入研究的過程中給臨床診療工作提供了重要的數據支撐。
1、鹿茸多肽
1.1從鹿茸多肽的存在形態上看,主要是在體外進行分化,主要是從神經干細胞朝著神經元的趨勢發展。相關的學者對鹿茸多肽的結構進行研究,發現其對神經元干細胞的發展起到一定的促進作用,而且其自身的營養成分也比較豐富。在促進神經元干細胞分化的過程中還可以對多因子成分進行調節,這樣才能夠協調神經系統的運行。
1.2在提升人體皮膚愈合速度的過程中可以采用馬鹿茸多肽成分,主要是通過促進人體表皮細胞的增殖來促進傷口的愈合程度。在進行這一研究的過程中,相關的學者主要是應用家兔和乳鼠等動物來進行的實驗。在其體外加入相應的天然鹿茸多肽以及合成鹿茸多肽懲罰呢,就可以加速動物表皮的修復程度。可見,鹿茸多肽可以促進人體表皮細胞的愈合,實現表皮細胞的增殖。
1.3鹿茸多肽-PLGA復合膜結構可以提升大鼠周圍神經損傷的修復程度。主要是這中鹿茸多肽的成分可以深入到復合膜中,使得其中的成分進行緩慢釋放,直接作用到周圍的神經系統。由于其生物活性相對較強,所以可以為臨床診療提供相對比較科學的依據。
1.4鹿茸多肽可以促進神經的再生,促進神經系統的修復功能。在對鹿茸對人體的神經損傷的修復程度進行研究的過程中可知,鹿茸多肽可以促進神經的再生,并且可以加快神經系統的生長,可以在修復的基礎上完全恢復功能。
1.5鹿茸多肽可以對軟骨細胞的體外凋亡現象進行抑制,為了對這一內容進行研究,主要是通過對兔類的白細胞進行觀察和研究,然后深入到兔類的骨髓部位。對凋亡的情況進行檢測。然后采用鹿茸多肽成分,就可以提升蛋白酶的活性,進而環境骨髓干細胞的凋亡形式進行環節和控制。提升生命體的成活率。可見,鹿茸多肽的活性成分比較明顯,而且對其進行的藥理學的研究工作還在繼續。
2、鹿茸多胺具有抗氧化作用
我國的多數學者都對鹿茸多胺進行了深入研究,經過研究可以看出,通過進行體外和體內的測定,鹿茸多胺可以對鼠類的過氧化反應產生嚴重的影響。不僅如此,還可以對體外的NADPH進行高效抑制。在體內還可以對四氯化碳成分的擴散程度進行抑制,形成氧化還原反應。這就是鹿茸的抗氧化作用的發揮。
3、鹿茸精
鹿茸精從其本質上看,可以對小鼠的抗衰老程度進行控制,而且通過實驗來對鹿茸精進行實驗,可見其活性程度比較強。可見,鹿茸精對MAO活性以及蛋白質合成也產生了一定的促進作用。對于老鼠來說,其作用明顯高于青年小鼠。
4、鹿茸的活性物質
4.1 蛋白多膚類化合物
鹿茸的再生、迅速增長是依賴于一系列內在激素和生長因子,近年來已經分離出能夠促進骨、上皮、血管及神經組織生長的活性蛋白。如堿性磷酸酶、胰島素樣生長因子、堿性成纖維生長因子。引、促生長釋放因子、神經生長因子、表皮生長因子、轉化生長因子及多種鹿茸多肽,已建立了一種高效可行的從鹿茸中提取單胺氧化酶抑制劑、胰島素樣生長因子的分離技術路線。
4.2 甾體類化合物
鹿茸的抗炎、強心、補腎及激素樣作用都與其所含甾類衍生物密切相關。鹿茸中含有雄性激素、雌激素和孕激素等甾體化合物。相關學者采用超臨界二氧化碳和溶劑萃取技術從鹿茸中提取天然性激素的技術路線。
4.3 多胺類化合物
鹿茸中的多胺類化合物也是一類重要活性成分,它們能刺激核酸和蛋白質合成。鹿茸尖部的多胺含量較高,且從上到下遞減。
5、鹿茸的藥理作用
鹿茸具有廣泛的藥理作用,其具有促進生殖系統發育、增強免疫功能、促進細胞增殖和傷口愈合、抗炎鎮痛的作用,已獲現代藥理學的多方面驗證。近年來的研究熱點主要集中在鹿茸對心血管系統、神經系統的作用以及抗關節炎、抗氧化、抗疲勞和抗衰老等方面。
5.1 對心血管系統的作用
鹿茸醇提物對心肌梗死模型大鼠心肌損傷有一定的保護作用。鹿茸醇提物能減小心肌梗死面積,減輕心肌損傷的程度。縮小壞死區范圍,減少內皮素釋放,減輕缺血區血管收縮,改善冠脈局部血液循環,從而延緩和減輕缺血缺氧對血管內皮細胞和心肌細胞的損傷過程,對血管內皮損傷起良好保護、修復作用。
5.2 對神經系統的作用
鹿茸中存在大量的NGF、IGF。NGF是一個典型的靶源性神經營養因子,是神經元的存活和維持所必需,調節神經元的表型及神經元的連接,參與神經再生。IGF具有多種生理功能,特別是影響細胞的增殖、分化和存活,在個體生長發育中發揮重要作用。IGF能增強神經元的分化。IGF和IGF均可作為肌源性神經營養因子促進神經元突起生長,刺激細胞增殖、分化、成熟和存活。
5.3 抗關節炎的作用
鹿茸的水提物(DAA)富含抗氧化多酚,能夠調節骨循環治療關節炎。藥物誘導的關節炎模型路易鼠注射DAA后,其骨無機質含量、強度、骨小梁形成數的減少幅度均小,破骨細胞的增加幅度也明顯較小。在關節炎的慢性期和急性期DAA都能夠消除關節的腫脹和畸變,并且在急性期結束后立即給藥還能夠延緩關節炎的發展。進一步的動物實驗證明DAA還能夠抑制細胞質、溶酶體中的蛋白酶和基質蛋白酶類的產生,同時由自由基引起的對關節液蛋白的損害也下降了20%。因此推斷它是通過降低蛋白水解酶和自由基的活性達到治療關節炎的作用。
5.4 其他
鹿茸神經節甙酯能促進小鼠腦內蛋白質合成,對抗記憶破壞藥物的作用,對小鼠記憶獲得、記憶再現、記憶鞏固均有明顯的促進作用。鹿茸提取物對東莨菪堿及亞硝酸鈉造成的兩種學習記憶障礙小鼠的學習記憶能力均有明顯的改善作用。
6、總結
近年來、隨著分離純化技術和分子生物學的不斷發展,已經從鹿茸中分離得到了具有不同藥理活性的組分,對部分活性物質進行合成或者克隆表達,并初步研究了其結構與功能的關系。少數活性物質已經初步闡明其作用機制,但仍不夠深入。鹿茸中還有許多活性成分沒有得到有效的分離,因此如何應用系統生物學方法獲得新的活性物質、研究其新的功能與作用機制,仍需要進一步的深入探索。
參考文獻
[1] 鄭磊.鹿茸糖胺聚糖的提取、分離純化及結構分析[D].東北林業大學2010.
[2] 周杰.鹿茸蛋白HPLC指紋圖譜研究及在線二維液相色譜的建立和應用[D].北京中醫藥大學2011.
[3] 孟麗莉.人參及鹿茸蛋白的分離純化[D].延邊大學2008.
鹿茸為梅花鹿或馬鹿的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角,前者習稱“花鹿茸”,后者習稱“馬鹿茸”。野生梅花鹿為國家一級重點保護動物,馬鹿為國家二級重點保護動物。鹿茸,不僅是一味中藥,也是貴重的饋贈滋補品。
中醫認為,鹿茸性溫,味甘、咸。歸腎、肝經。有壯腎陽、益精血、強筋骨、調沖任、托瘡毒之功效。用于陽痿滑精、宮冷不孕、神疲、畏寒、眩暈耳鳴耳聾、腰脊冷痛、筋骨痿軟、崩漏帶下、陰疽不斂。現代研究發現,鹿茸含19種以上氨基酸、類脂、糖類、多胺類等化合物以及鈣、磷、鐵等二十余種元素,具有強壯、抗脂質過氧化、延緩衰老、鎮痛鎮靜、益智、降壓、抗心律失常、增強免疫、促進物質代謝、促進創傷愈合、抑制胃潰瘍、增強等多方面的作用。
梅花鹿家養于吉林、黑龍江、遼寧、河北、北京、天津、江蘇、四川、上海等地,馬鹿家養于新疆、青海、黑龍江、內蒙古、四川西部、云南等地。 雄鹿從第三年開始鋸茸,“二杠”(具一個分枝者)每年采2次,第一次在清明后45~50天,習稱“頭茬茸”,第二次約立秋前后,習稱“二茬茸”;“三岔”(具二個分枝者)每年采收1次,通常在7月下旬鋸取。鹿茸需經加工方可用于治病和保健,一般取鹿茸,燎去茸毛,刮凈,以布帶纏繞茸體,自鋸口向小孔灌入熱白酒或黃酒,并不斷添酒,至潤透或灌酒稍蒸,橫切薄片,壓平,干燥;鹿茸粉則取鹿茸,燎去茸毛,刮凈,劈成碎塊,研成細粉。
【藥材性狀】
一支鹿茸的切片部位不同,其性狀、名稱和質量也不同。
以梅花鹿為例,其鹿茸頂部細嫩,呈棕黃色,光亮,皮內半透明黃白色,蠟狀油潤,制成的是“血片”或“蠟片”,為類圓形或橢圓形薄片(厚0.4~0.5毫米),直徑2厘米以內,斷面淡紅棕色,半透明,微顯光澤,邊緣有一紅棕色或棕色環,無骨質,質堅韌。鹿茸的中上部切片稱 “頭沙片”,接下的部位為“二沙片”,統稱“粉片”,為圓形或類圓形略厚片(0.5~1毫米),直徑2~3厘米,中間密布蜂窩狀細孔,半透明,角質,無骨質或略具骨質,邊緣有黃褐色環,寬1~2毫米,周邊粗糙,偶可見殘留的毛茸。氣微腥,味微咸。
馬鹿茸血片、蠟片為圓形薄片,表面灰黑色,中央米黃色,半透明,微顯光澤,外皮較厚,周邊灰黑色,質堅韌。氣微腥,味微咸。粉片中央有細蜂窩狀小孔,外皮較厚,周邊灰黑色,質堅脆。
鹿茸粉為灰白色或黃色粉末。氣微腥,味微咸。
【小竅門】
正品鹿茸片入水不變形,加熱攪拌不破碎,煮沸不軟不糊,一些偽品入水軟化變形,加熱攪拌則破碎,煮沸會成糊狀。
【辨別真偽】
因為鹿茸資源稀少,不法分子為牟利將偽劣品混跡市場,影響大眾的健康。
常見鹿茸偽品:
1. 用鹿角片冒充,呈圓形和半月牙形,中部焦黃色,孔大且多破裂,有些孔內有黑褐色填塞物,白色,邊緣角質化程度高,甚至會有齒狀突起;
2. 將藥廠提取過的鹿茸粉曬干,用雞蛋清調和后用鹿皮包裹,加工成薄片,外觀無蜂窩狀,口嘗粘舌,并能化掉;還有將酒泡或工業提取過的鹿茸片(有效成分被抽提過),除去酒氣,冒充鹿茸片。
3. 用動物皮毛(如老鼠皮)包裹其他動物骨,或骨膠、松香經切制而成,有的以豬皮包裹面粉、豬血混合物,還有用小野貓皮包裹淀粉、豬肝、骨膠、瓊脂混合物再切片。呈類圓形片狀,大小不等,較重,不易折斷,斷面棕紫色,無蜂窩狀的細孔,有的有粗孔,偶有凹點,外皮毛有接縫且可剝離,腥氣濃;有的外皮為真品鹿茸片,里面填充其他物質。
4. 以鹿科其他動物的幼角,如駝鹿茸、馴鹿茸、水鹿茸、白鹿茸、狍茸、麂茸、白唇鹿茸、麋鹿茸、海南坡鹿茸混充鹿茸。
5. 保健品市場有種棕褐色冒牌貨,片子厚實,卻易碎裂,外皮無茸毛,中間沒有蜂窩狀小孔,色澤區別明顯,過渡不自然。遇到碘試劑變藍紫色,是用淀粉、色素等加工制成的偽品。
劣質品:用化學藥水,如漂白水處理鹿茸片,使之特別凈白,口嘗無味,但有熒光;將正品中摻加一些提取過的茸片,如果仔細檢查,會發現有的茸片色淡白,茸灰色,外皮不黑,茸片粉性差,蜂窩狀小孔大或破裂,無腥氣,味淡,不咸。
最好到正規藥房購買,并注意預防鹿茸及其飲片發霉或生蟲,將其充分干燥后與適量花椒放置通風干燥處存放。
【如何服用】
在使用前,建議先請中醫辨證,切不可盲目用藥。
鹿茸作為名貴細料藥,一般宜研末,每次1~2克,用溫水或溫黃酒吞服或單獨燉服,避免浪費;或配以其他藥粉制丸,而不與其他藥味共煎;或取茸片2克、紅棗1枚、生姜1片、米酒少許裝入有蓋的杯中,加半杯水,隔水文火燉蒸2~3小時,服藥汁;也可泡酒飲用,一般500毫升酒用5克鹿茸。
鹿茸3~5克與瘦肉、家禽同燉,分次食用后可增強,能治療腰膝酸軟、血虛暈眩、精疲力乏等證。
關鍵詞 鹿茸;加工技術;原理;工藝
中圖分類號 R282.74 文獻標識碼 B 文章編號 1007-5739(2013)05-0309-01
茸鹿是經濟價值很高的藥用動物,特別是鹿茸具有補中益氣、壯陽、生精、調血脈、益智、散瘀、消腫、活血等功效,現代醫療實踐中被廣泛用于內科、外科、婦科、兒科等多種疾病的治療中。鹿茸加工就是將鮮鹿茸脫水干燥,加工成干品的商品茸,以便于保存和運輸。鹿茸加工技術的好壞直接影響產品的質量和經濟效益,是養鹿生產中極為重要的環節。
1 排血鋸茸加工技術
1.1 煮炸方法
1.1.1 第1排水煮炸。首先將水煮沸,浸入鹿茸燙5~10 s,注意全茸都要浸入,只露鋸口。然后將燙過的鹿茸取出,檢查排除暗傷。對于有傷痕或者虎口封閉不嚴等情況,應當采取措施防止其在煮炸中破裂,增強茸體的抗熱能力,需要敷蛋清面處理,并下水達到固著封閉的目的。做好上述處理后進入第1排煮炸。最初1~5次煮炸的時間應當逐次延長。為了促進皮血的排出,在沸水中振蕩和推拉茸干上半部以及嘴頭部分,帶水攪拌,2~3次煮炸后,繼續下水,直至茸根部分,切忌使鋸口浸入水中。此過程中可以進行靜水煮炸或者動水煮炸,即輕輕地做往復推拉和劃圓運動。隨著下水煮炸次數和時間的增加,茸體內部受熱,至4~5次下水時,血液開始從鋸口排出,此時應用長針挑鋸口周圍的皮血管,將血栓拔出,并向茸髓部位深刺數針。為了利于排血,也可以用毛刷蘸溫水刷洗鋸口。逐漸延長下水煮炸的時間,當鋸口排完大血、流出血沫時,第1排水煮炸即可結束[1]。
1.1.2 第2排水煮炸。完成第1排水煮炸后放涼降溫,如果茸皮不燙手便可進行第2排水煮炸。第1次與最后一次煮炸的時間相同,其他的煮炸時間逐漸縮短。有的鹿茸,在第1排水時已經基本煮好,因為其皮薄、眉枝細老、抗熱力差,因此在第2排煮炸過程中只需煮茸尖和主干上半部,注意在水下、水中間和出水前把眉枝和茸根提出水面,即提根煮頭。為了避免眉枝擼皮,可事先在眉枝尖敷蛋清面。當鋸口排出的血沫由多變少,顏色也由深紅變為淡紅,繼而出現粉白沫時,說明全茸基本熟透,茸內血液基本排凈,即可結束第1次水煮炸加工。將鹿茸全部(連同鋸口)入水煮炸10 s左右取出,剝去蛋清面,用毛刷蘸溫水刷去茸皮上附著的油脂污物,再用柔軟紗布或毛巾徹底擦干,連同茸架一起送至風干室中,放在通風良好的臺案上風干。
1.2 經回水烘烤、風干和煮頭等工藝后制得成品茸
把鹿茸經過第1水煮炸加工后,第2~4天繼續煮炸稱為回水。回水又可分為第2水、第3水和第4水。回水烘烤的主要目的是防腐、消毒、加速干燥。每次回水后都要在68~75 ℃烘干箱中烘烤40~60 min,以促進鹿茸的干燥。烘烤以后送風干室冷涼風干。經過回水(4次煮炸、3次烘烤)后的鹿茸,含水量比鮮茸減少50%以上,以后靠自然風干為主,適當的進行煮頭和烘烤。最初5~6 d每隔1 d煮1次茸頭,烘烤20~30 min后自然風干;以后便可根據茸的干燥程度和氣候變化情況不定期地煮頭與烘烤,避免空頭與癟頭。鹿茸每次水煮和烘烤后都應送入風干室脫水風干。每天應由專人對風干的鹿茸檢查1遍,對茸皮發黏、茸頭變軟的鹿茸及時回水和烘烤。特別是在空氣濕度大時,更應注意增加煮炸或烘烤次數,防止糟皮。風干室必須通風干燥,陰雨天及時關好門窗,隨時撲滅蒼蠅和昆蟲[2]。
2 帶血鋸茸加工技術
帶血茸是將茸內血液全部保留在茸內的成品茸,由于茸內流體有效成分不流失或少流失,不僅提高了產品質量,而且鮮茸的干燥率增加2.4%~3.2%,提高了成品率。帶血茸加工是一項操作復雜、要求嚴格的技術,包括封鋸口、稱重、測尺、編號、登記、洗刷茸皮、煮炸與烘烤和煮頭與風干等過程。收茸后的前4 d每天煮炸1次,烘烤2次。從第5天開始,連日或隔日回水、煮頭或烘烤1次。到鹿茸8成干時可視情況不定期煮頭、烘烤。煮炸時間、烘烤時間與溫度視茸的重量、茸形結構、鹿茸種類、茸體分杈處愈合程度、茸皮厚薄及茸質老嫩程度靈活掌握。對分杈處皮薄、封口不嚴以及其他皮薄處涂蛋清面。破損、外傷應做包扎或涂蛋清面處理。
3 雙電子自動控制遠紅外線烤箱加工鹿茸新技術
該技術采用現代先進電子技術,根據鹿茸結構、加熱性質和工藝制作而成,具有充分發揮遠紅外線加熱效率高、節約能源、脫水快等特點[3-4]。應用該技術程序簡便,工效高,成品茸質量好,能夠達到商品規格要求。其主要工藝流程如下:新鮮鹿茸封鋸口洗刷去污燙煮茸皮冷涼雙電子遠紅外線加熱烘干冷涼回水雙電子遠紅外線加熱烘干煮頭造型成品茸。
4 冷藏保鮮、遠紅外線鹿茸加工技術
該技術應用現代先進技術,改進傳統鹿茸加工技術,具有程序簡便、工效高、節省能源、成品茸質量好等特點[3]。主要工藝流程為:新鮮鹿茸封鋸口(排血茸排血)燙洗茸皮吹風冷涼冷藏保鮮遠紅外線加熱解凍吹風冷涼回水遠紅外線烘干吹風冷涼煮頭造型成品茸。
5 活性鹿茸加工技術
5.1 原理和設備
活性鹿茸加工技術原理是采用現代生物制品冷凍保鮮和干燥原理,對新鮮鹿茸進行冷凍保鮮與真空脫水干燥的一種新型加工方法。與遠紅外線烘烤沸水煮炸加工鹿茸方法相比,其加工周期僅是傳統加工方法的1/20~1/15,節省人力75%,節省能耗68%,減少破損率97%,增加干茸重3.8%~4.2%。冷凍保鮮茸色澤鮮艷,茸形完整,茸質優良。活性凍干茸茸皮松軟,色澤鮮艷,茸頭飽滿,開條含血充足,血色鮮紅,不酸敗,無異味,無焦化。比傳統方法加工的鹿茸氨基酸總含量高27.59%,谷草轉氨酶(GOT)、谷丙轉氨酶(GPT)、堿性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、谷氨酰轉肽酶(R-CT)、膽堿酯酶(CHE)等7種酶活力高2.5~250.0倍。活性鹿茸加工設備:大規格冰箱、水浴消毒器和真空凍干機。
5.2 活性鹿茸加工工藝
5.2.1 冷凍保鮮。鮮茸稱重登記冷凍貯藏去污消毒冷凍貯藏冷凍保鮮。將收取的鮮茸鋸口向上迅速送入加工室稱重登記,然后放入冰箱內冷凍貯藏。在-18~-15 ℃可冷凍貯藏保鮮1~2個月;在-24~-18 ℃可冷凍貯藏保鮮3~8個月。
5.2.2 凍干加工。新鮮鹿茸或冷凍保鮮茸速凍脫水活性茸。將鹿茸放入預冷的凍干箱內,箱內真空度0.67~1.33 Pa,板溫-48~-38 ℃,冷凍脫水72 h,即可獲得活性凍干茸。
5.3 活性鹿茸加工新技術的工藝特點
采用冷藏保鮮方法可將零星收取的新鮮鹿茸按照不同規格和種類分別冷凍貯藏,實現有計劃地批量加工作業,從而提高了加工效率,節省人力和能源[5-8]。在高真空條件下,使鮮茸內的水分速凍成冰,直接升華脫水干燥成干品活性茸,能夠最大限度地保持茸內的有效成分及其生理活性。因此,活性鹿茸質量更佳。
6 參考文獻
[1] 馬麗娟.特種動物生產[M].北京:中國農業出版社,2006:159-196.
[2] 趙世臻.淺談鹿茸加工[J].特種經濟動植物,2005(6):37.
[3] 劉軍.鹿茸的凍干新工藝及性質[J].真空科學與技術學報,2011,31(2):229-233.
[4] 李澤軍.鹿茸加工新技術[J].農村新技術,2008(6):66.
[5] 馬齊.鹿茸低溫冷凍干燥加工技術[J].經濟動物學報,2007,11(1):21-22.
[6] 張慶雙,楊鵬,羅劍通,等.淺談梅花鹿帶血茸加工工藝[J].吉林畜牧獸醫,2012,33(5):63-64,66.
【關鍵詞】綿毛鹿茸草;次生代謝;抑菌活性
Abstract:[Objective]ToanalysethecontentofsecondarymetabolismsandantibacterialactivityofMonochasmaSavatieriFranch.exMaxim.[Method]Thecontentsof5secondarymetabolitessuchasflavonoid,chlorogenicacid,tannin,phenolandanthraquinonesinthedifferentextractsofMonochasmasavatieriFranch.exMaximweredetermined.[Results]Itshowedthattheantibacterialactivityoftheliquidsextractedwith70%ethanol,60%acetoneonStreptococcuspneuoncae,Staphylococcusaureus,EscherichiacoliandBacillussubtilisweremoderate,whilethatoftheliquidsextractedwithwaterwasweak.Theliquidsextractedwith70ethanolwerethebetterinhibitorofStreptococcuspneuoncaeandStaphylococcusaureus,whiletheliquidsextractedwith60acetonewerethebetterinhibitorofEscherichiacoliandBacillussubtilis.[Conclusion]TherewaspositivecorrelationbetweentheantibacterialactivityoftheliquidsofMonochasmasavatieriFranch.exMaximonEscherichiacoliandthecontentofthechologenicacid.TherewasalsomarkedcorrelationbetweenthatofBaillussubtilisandanthraquinones.
Keywords:monochasmaSavatieriFranch.exMaxim;secondarymetabolism;antibacterialactivity
綿毛鹿茸草(MonochasmasavatieriFranch.exMaxim)為唇形科鹿茸草屬植物,別名白頭翁、千重塔、白頭毛,分布于浙江、福建、江西,常生于山坡向陽處雜草中或馬尾松林下[1]。主要功能為清熱解毒,祛風行氣,涼血止血,祛痰,用于感冒,慢性氣管炎,肺炎,咳血,吐血,便血,牙齦炎,牙髓炎,乳癰,癰腫,小兒口瘡,風濕關節痛等。本文對綿毛鹿茸草的不同提取液中總黃酮、總綠原酸、總生物堿、總皂甙及其對肺炎雙球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌抑菌活性進行研究,并探討這五類次生代謝產物與抑菌活性之間的相互關系。
1實驗與方法
1.1實驗材料和儀器綿毛鹿茸草于2007年6月采自浙江千島湖姥山林場的山坡上。采集時將棉毛鹿茸草全草用濕布包裹,塑料袋封裝,立即帶回實驗室。將材料洗凈,防入105℃恒溫干燥箱中固定25min,再在80℃條件下干燥24h,研磨后經過0.25mm金屬網篩,將烘干樣品放入磨口廣口瓶,置于干燥器中保存,備用[2]。標準品蘆丁、綠原酸、小蘗堿、人參皂甙Rb,1,8二羥基蒽醌購自中國藥品生物制品檢定所,所用試劑均為分析純。四種菌種均由浙江臺州醫院無償贈送。培養基為牛肉膏培養基。吸光度的測定在T6新世紀紫外-可見分光光度計上完成。
1.2綿毛鹿茸草提取液的制備稱取綿毛鹿茸草粉末3份,每份1g,其中2份分別用70%乙醇、60%丙酮在80℃水浴中回流6h,進行提取,離心取上清液,并清洗殘渣2次,離心取上清液,將3次上清液合并;另1份用沸水進行提取0.5h,離心取上清液,反復多次,直至提取液色淡,并將幾次沸水提取液混合。將乙醇、丙酮、沸水提取液的濃縮,并調節pH至7.0,然后用蒸餾水定容至1ml,放入4℃的冰箱中待用。
1.3次生代謝產物含量的測定
1.3.1總黃酮的提取與測定[3]取上述綿毛鹿茸草提取液樣品0.2ml,揮去溶劑后用甲醇定容至25ml,取其中1ml,置10ml離心管中,加入4ml0.1mol/L三氯化鋁-甲醇溶液,搖勻,在420nm處測定吸光度。以蘆丁為標準品,其回歸方程為y=9.6101x+0.0147,R2=0.9991。
1.3.2總綠原酸的提取與測定[4]取上述綿毛鹿茸草提取液樣品0.2ml,揮去溶劑后用95%乙醇定容至25ml,取1ml,置25ml容量瓶中,加入0.2mol/LHCl定容至刻度,搖勻,以試劑空白為對照,在324nm處測定吸光度。以綠原酸為標準品,其回歸方程為y=66.064x+0.0134,R2=0.9995。
1.3.3總生物堿的抽提與測定[5]取上述綿毛鹿茸草提取液樣品0.2ml,揮去溶劑后用90%乙醇定容至25ml。取提取液1.4ml置于精密加入4ml氯仿的分液漏斗中,加入7.2×10-4mol/L溴甲酚綠pH=4.42緩沖溶液0.6ml,振搖1min,靜置1h,取澄清的氯仿液,以試劑空白作對照,于417nm處測定吸收度。以小檗堿為標準品,其回歸方程為y=6.6x-0.0102,R2=0.9999。
1.3.4總皂甙的提取與測定[6]取上述綿毛鹿茸草提取液樣品0.2ml,揮去溶劑后用甲醇定容至25ml,取1ml置25ml容量瓶中,揮去溶劑后,加入0.2ml5%香草醛冰醋酸溶液,再加入0.8ml高氯酸,于70℃水浴加熱20min,取出,冷卻,加5ml冰醋酸,以試劑空白作對照,于560nm波長處測其吸光度。以人參皂甙Rb為標準品,其回歸方程為y=27.763x+0.0901,R2=0.9716。
1.3.5游離蒽醌的提取與測定[7]取上述綿毛鹿茸草提取液樣品0.2ml,放入10ml離心管中,水浴蒸干溶劑,加入5%醋酸鎂乙醇溶液5ml,以試劑空白為對照,在498nm處測定吸光度。以1,8二羥基蒽醌為標準品,其回歸方程為y=47.464x+0.0012,R2=0.9996。
1.4抑菌活性的研究以濾紙瓊脂擴散法測定綿毛鹿茸草三種溶劑提取物對肺炎雙球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌的抑菌效果。將經過記數的菌液稀釋后,控制100μL含104cfu,涂平板。將滅菌后濾紙片(直徑為6mm)浸泡在棉毛鹿茸草提取液中。在已涂菌的平板上放置上述濾紙片,并以蒸餾水為陰性,鏈霉素為陽性對照,每一樣品重復3次。處理后的平板放在30℃培養24h,觀察并記錄抑菌圈的直徑大小[8]。
1.5數據的處理試驗處理及數據測定均重復3次,將所得數據輸入SPSS11.5forWindows數據分析系統進行統計,并對次生代謝產物的含量與抑菌圈的大小進行相關分析。
2結果與分析
綿毛鹿茸草不同提取液次生代謝產物含量以及它們對四種細菌的抑菌圈大小如表1所示。其中次生代謝產物的含量為百分含量,抑菌活性以抑菌圈的大小(mm)表示,陰性對照抑菌圈直徑6mm,陽性對照(鏈霉素)抑菌圈26mm;抑菌圈直徑在6~8mm為微弱抑菌,8~12mm為弱抑菌,12~20mm為中等抑菌,20~24mm為強抑菌。綿毛鹿茸草的的次生代謝產物和抑菌圈直徑的相關性如表2所示。
表1綿毛鹿茸草提取液次生代謝產物的含量(g/kg)及其抑菌圈直徑(略)
2.1綿毛鹿茸草提取液次生代謝產物含量和抑菌活性分析從表1中可以看出:總黃酮、總綠原酸、游離蒽醌三種次生代謝產物的含量均為70%乙醇提取液>60%丙酮提取液>水提取液,最高含量分別為1.403g/kg、72.752g/kg、0.043g/kg;生物堿和皂甙的含量為60%丙酮提取液>70%乙醇提取液>水提取液,最高含量為1.677g/kg和5.418g/kg。中國
對進肺炎雙球菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用均是60%丙酮提取液>70乙醇提取液>水提取液,最大抑菌圈直徑為15.47mm和17.40mm,為中等抑菌作用;對大腸桿菌和枯草桿菌的抑制作用是70乙醇提取液>60%丙酮提取液>水提取液,最大抑菌圈直徑為19.03mm和14.83mm,為中等抑菌作用。水提取液對肺炎雙球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌的抑菌圈直徑均在9~12mm之間,具有弱抑菌作用。可以看出綿毛鹿茸草的70%乙醇提取液和60%丙酮提取液是良好的抑菌劑。
2.2不同提取液的次生代謝產物含量與抑菌活性的相關性分析從表2可以看出:黃酮與蒽醌之間存在顯著的正相關,推測綿毛鹿茸草中這兩種次生代謝產物可能具有相同的合成底物或具有相同代謝途徑;大腸桿菌的抑菌活性與綠原酸的含量具有顯著的正性關,推測綿毛鹿茸草對大腸桿菌的抑制作用可能是提取液中的綠原酸起的作用;蒽醌與枯草芽孢桿菌之間存在極顯著的相關性,說明綿毛鹿茸草對枯草芽孢桿菌的抑制作用主要是蒽醌作用的結果;肺炎雙球菌和金黃色葡萄球菌之間具有顯著的相關性,而與所測的5種次生代謝產物之間都沒有顯著相關性,因此推測綿毛鹿茸草中其它某些物質對肺炎雙球菌和金黃色葡萄球菌均有一定抑制作用。
表2綿毛鹿茸草不同提取液的次生代謝產物含量與抑菌活性的相關性(略)
水平顯著差異:*P<0.05,**P<0.01
3討論
次生代謝是植物的重要特征,其產物既具有重要的生態學意義又可決定各類植物在進化過程中的興衰成敗、生死存亡等問題[9],植物中的次生代謝產物還具有抗過敏、降血壓、抗炎、抗菌、抗突變、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化等多種活性。
綿毛鹿茸草對70%乙醇提取液、60%丙酮提取液、水提取液對肺炎雙球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌均有抑制作用,前兩者為中等抑制作用,后者為弱抑制作用;70%乙醇提取液是肺炎雙球菌、金黃色葡萄球菌的良好抑制劑,60%丙酮提取液是大腸桿菌、枯草芽孢桿菌的良好抑制劑。推測對大腸桿菌和枯草桿菌的抑制作用主要由提取液中的綠原酸和蒽醌引起的。
文獻查閱得知:金銀花中綠原酸的平均含量為56.92g·kg-1[10],巴戟天樣品的游離蒽醌含量為的范圍為0.013~0.049g·kg-1[7]。綿毛鹿茸草70%乙醇提取液中總綠原酸、游離蒽醌的含量72.752g·kg-1、0.043g·kg-1。從中不難看出:70%乙醇提取液是綿毛鹿茸草的良好提取劑。至于綿毛鹿茸草中這些次生代謝產物的分子組成、分子結構等方面內容有待進一步的研究。
【參考文獻】
[1]中國科學院植物研究所.中國高等植物圖鑒(第四冊)[M].北京:科學出版社,1987:97.
[2]何維明,鐘章成.絞股監種群次生代謝產物的動態及其生態學意義[J].云南植物研究,1998,20(4):434438.
[3]李鈞敏,金則新,楊蓓芬.云錦杜鵑總黃酮含量及成分分析[J].西北林學院學報,2004,19(1):110112.
[4]邢俊波,李萍,溫德良.不同物候期金銀花中總綠原酸的積累動態研究[J].中國中藥雜志,2001,26(7):456459.
[5]王沖之,孫健,李萍.貝母類藥材生物堿及生物堿苷含量測定方法學研究[J].中國藥學雜志,2003,38(6):417418.
[6]宋永良.復方乳鴿膠囊中絞股藍總皂甙含量測定[J].浙江中醫學院學報,2002,26(3):77.
[7]陳紅紅,黃麗玫.德慶等地巴戟天中蒽醌及多糖的含量測定[J].廣東藥學院學報,2002,18(2):103105.
當前,市場上的加有補藥的糖果、糕點、酒、飲料等所謂滋補食品,像鹿茸糖、人參糖、鹿茸酒、杜仲酒、當歸飲料等,廠家在商標說明和廣告上冠之以“青春美容”、“延年益壽”、“養顏回春”、“提神益智”、“抗癌”、“滋補”的美名,吸引了不少人慷慨解囊,競相食用。
加藥物的食品并不是適合每個人吃的,沒病的健康人吃了不但無益,反而可能受害。
藥品與食品不同,食品是各種供人食用或者飲用的成品和原料,有些食品對某些疾病有一定療效,例如綠豆、赤小豆、姜、大棗等,但它不是以治療為目的的。藥品是指用于治療、預防、診斷疾病或用于規定有適應癥、用法、用量的醫療用品。無論是中藥,還是西藥,只能是治療一定的疾病,對某些患者有治療作用,而對健康人則是有害無益的。有些藥品與之間往往只有服用數量的差別,即藥品在一定的劑量下可以治療疾病,過量就是,會引起中毒,甚至發生更嚴重的問題。
在一些酒、糖果、飲料中加進了一些人參、黨參、黃芪、當歸、鹿茸、熟地、黃精、杜仲等,這些“補藥”也是藥物,有一定的適應癥,只能治療一定的疾病。尤其是其中的人參、鹿茸、黨參,藥理作用較強,對健康人是無益的,對兒童甚至是有害的,會影響其正常發育。
祖國醫學認為,“補藥”系為正氣補虛而設,凡身體健康,臟腑活動正常者,就不需要使用“補藥”,否則可導致陰陽失調,臟腑正常活動受到擾亂;即使是虛癥患者,又分氣虛、陽虛、血虛、陰虛四種。因此,“補藥”也根據其作用和應用范圍相應地分為補氣藥如人參、黨參、黃芪等;補陽如鹿茸等;補血如當歸熟地、何首烏等;補陰有枸杞等。不同的虛癥要用相應的補藥,如果用藥不對癥,或者盲目濫用,對人體不但無益,有時反而引起不良后果。
補藥與任何藥物都一樣,是有毒性的。以鹿茸為例,有的人吃了鹿茸會引起鼻出血、牙齦出血等中毒現象。古人對鹿茸早有記載:“補精填髓之功效雖甚偉,服食不善,往往發生吐血、衄血、尿血、目赤、頭暈、中風昏厥等癥。”《中華人民共和國藥典》明確規定,高血壓病、腎炎、肝炎及肝腎功能不正常者忌服鹿茸。現代研究表明,鹿茸中含有雌二醇、雌酮,是鹿茸具有雌激素樣作用的主要成分。實驗還證明,從鹿茸中抽提的鹿茸精含有雄性內分泌素,只能用于治療陽痿。可見,如果患有高血壓病、腎炎、肝炎的人飲了鹿茸酒,或兒童吃了鹿茸糖是十分有害的。再拿人參來說,有的人吃了少量人參就會引起胃部脹悶、難受,食欲下降;有的兒童吃了就大量流鼻血;如果食用大劑量,更可出現中毒現象,表現為全身玫瑰疹、瘙癢、暈眩、頭痛、體溫升高及出血。此外,有人服當歸,也是不適宜的。古代醫書上就有“腸胃薄弱、泄瀉溏薄及一切脾胃病、惡食、不思食及食不消,并禁用之”的記載。可見加人參、當歸的酒、糖等食品也不是人人都可用來滋補的。加其他補藥的食品也同樣如此。
除加中藥補藥外,有些食品還濫加了一些西藥。比如,有的糖果中加入了洗必泰,一般人食用過多時可造成腸道菌群紊亂。有的糖果中加入維生素A、維生素D,稱為電視糖,宣傳說吃了它,看電視可保護眼睛,但食用過多也可造成維生素A、維生素D中毒。還有的嬰兒蛋卷或餅干中加入谷維素,宣傳說能增加營養,提高大腦功能。其實,谷維素只是治療植物神經功能失調的藥物,主要用于周期性精神病、精神分裂癥、腦震蕩后遺癥等,而無病食用這種加谷維素的餅干則會出現皮疹、皮癢、脫發等許多不良反應。
在食品中加入的上述藥物(除維生素A、維生素D外),不是食品的正常成分,也不是人體需要的營養素,對食品本身等于是一種污染。這種在食品中濫加藥物并于市場上銷售的做法,對人民健康有害,是違反《中華人民共和國食品衛生法》的,也是違反衛生部和國家中醫藥管理局《禁止食品加藥衛生管理辦法》的,在購買這類食品時應十分慎重。
祖國醫學傳統上使用某些食品用于治療目的,在醫學上稱為食物療法,這與食品中濫加藥物是不同的。如確為治療目的而生產的食品,則應視為食物劑型的藥品,經藥政部門鑒定、審核后,可作為藥品在藥房出售。按照傳統,既是食品又是藥品以及作為調料的,如大棗、核桃、薄荷、木耳及姜、蔥、蒜、茴香、大料、胡椒、山楂、黑芝麻、桂皮等,加在食品中對人體無害,不屬于加藥物食品,人人皆可任意購買食用。
1、功效主要就是起到補氣血的作用,同時也可以起到增加免疫力的作用,如果就是身體比較虛弱,或者是有氣血不足等情況,都可以應用鹿茸紅參進行燉骨頭服用,同時也注意不要長時間的進行應用,如果有上火的情況下也盡量減少應用,否則也容易導致火大的情況發生。
2、紅參鹿茸燉骨頭的功效與作用,紅參,性溫,可以用來補血。
3、鹿茸,可以用來補虛,對于治療神經衰弱、失眠等有一定的作用。瘦肉,富含蛋白質,可以滋陰潤燥。
4、紅參鹿茸再加上骨頭放在一起燉湯吃,能夠強健筋骨,溫腎壯陽,補血益氣,治療子宮虛冷,還能美容養顏、抗衰老,具有很好的醫療保健和養生的功效與作用。
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人參+酒補氣虛
中醫認為,人參性溫,味甘、微苦,入脾、肺兩經,具有大補元氣的功效。現代藥理研究表明,人參中含有的主要有效成分人參皂甙和黃酮類物質,具有抗衰老、提高免疫力、調節血脂、防止血管硬化等作用。
推薦——人參酒:將人參切成段或薄片,浸入優質白酒中,加蓋密封,置于陰涼處,每日振搖1次,浸泡7天后飲用。具有大補元氣、補脾益肺、安神益智的功效,尤適用于久病氣虛、脾肺不足者。
阿膠+芝麻補血虛
中醫認為,阿膠性平味甘,入肺、肝、腎三經,以滋陰養血著稱。歷代醫家視阿膠為婦科良藥,對調治各種婦科病有獨特功效,尤得女士們青睞。
推薦——阿膠冰糖煲芝麻:取阿膠500克,浸在1500毫升黃酒內,待膠塊呈海綿狀時,隔水蒸成液體,趁熱加冰糖1000克,當糖與膠融為一體時,加入炒熟的黑芝麻及敲碎的核桃仁各適量,制成黏稠膏滋,每日早晚各取1~2匙,溫開水沖服。
鹿茸+小米補陽虛
李時珍在《本草綱目》中稱:“鹿茸能生精補髓、養血益陽、強筋健骨,治一切虛損……”現代藥理研究表明,鹿茸含多種氨基酸、骨膠原、蛋白質和礦物質,具有滋補、強壯的作用,服用后可使人精力充沛。
推薦——鹿茸小米粥:將鹿茸研為細末,每次取1克,放小米粥內服用。鹿茸性溫,味甘、咸,入肝、腎兩經,具有補腎壯陽的功效;小米性溫,有養胃的功效,兩者相配,滋補效果更好。
蟲草+老鴨補陰虛
【關鍵詞】 鹿茸多肽;大鼠;軟骨細胞;增殖
Abstract Objective: The purpose of the present was to investigate the effect of pilose antler polypeptides(PAP) on the proliferation of rat chondrocyte in vitro.Methods: The rat articular chondrocytes were isolated by enzyme digestion and sub-cultivated in serial.The 4th chondrocyte was interfered with PAP.The chondrocytes of different generations and the 4th medicine intefered generation were detected with the methods of proliferating cell nuclear antigen , MTT(methyl thiazolyl tetrazolium) assay for proliferation and Flow cytometry for analyses of cell cycle distribution and PI(proliferation index).Results: With chondrocytes passage time increasing, the proliferating ability of chondrocytes descended.MTT assay showed that the proliferating ability of chondrocytes decreased, the expression of PCNA tapered in the experiment of immunohistochemistry, and PI descended in flow cytometry for analyses.PAP can inhibit the tendency and strengthen the proliferating ability of chondrocytes in serial subcultivation.Conclusion: PAP can significantly improve proliferation of chondrocytes in serial subcultivation.
Key words Pilose antler polypeptides(PAP); Rat; Chondrocyte; Proliferation
關節軟骨缺損是臨床上常見的損傷,它可導致關節面不平整,從而繼發骨性關節炎。用組織工程軟骨修復關節軟骨缺損是目前正在嘗試的一種新方法,具有良好的發展潛力。關節軟骨細胞是組織工程理想的種子細胞,但如何分離獲取數量多、活性高、分化良好的軟骨細胞是組織工程培養技術中的重要問題之一。近年來對生長因子在關節軟骨形成和退變過程中的作用日益受到重視,并開展了廣泛的研究,認為種子細胞需要適應生長因子的調控才能獲得良好的生物活性。由于鹿茸生長的特殊性,故人們推測鹿茸中可能存在某種活性物質控制并刺激鹿茸生長。鹿茸多肽(PAP)是從梅花鹿茸中提取的一種多肽類生物活性因子,為鹿茸的主要活性成份。因此,本研究采用體外培養大鼠軟骨細胞的方法,觀察PAP對其增殖的影響,為優化組織工程的種子細胞提供一定的理論和實驗依據。
1 材料
1.1 實驗動物 SD大鼠(閩驗證字20050001,合格證號2005C03),清潔級,福建醫科大學實驗動物中心提供,3~4周齡,體重180~200g,皆為雄性,共8只。
1.2 主要試劑 αMEM培養基(Gibco公司)、胎牛血清(FBS,HyClone公司);胰蛋白酶1∶250(Trypsin,Amersco公司)、Ⅱ型膠原酶(Sigma公司)、PBS(Gibco公司);噻唑藍(MTT,上海申能博采公司),二甲基亞砜(DMSO,Amersco公司);增殖細胞核抗原PCNA(美國NeoMarkers公司);PAP粉針由長春中醫學院趙文海教授惠贈。
2 方法
2.1 大鼠軟骨細胞的獲取、鑒定與藥物干預分組情況 取4周齡體重180~200g的SD大鼠,斷頸處死,參考Hu等[1]軟骨細胞分離培養方法進行實驗,獲取軟骨細胞置于5%CO2混和氣體環境、37℃恒溫箱內單層培養,隔3日首次換液,8~10 天達85%融合后進行傳代培養。以傳代次數(passage,P)分組,P0即原代細胞,P1即第1次傳代后細胞,P2即第2次傳代培養細胞,余類推。軟骨細胞鑒定采用阿力新藍染色法檢測GAG合成、免疫組化法及RT-PCR法檢測Ⅱ型膠原表達[2]。實驗分組為P2組、P3組、P4組及鹿茸多肽不同劑量組(低、中、高不同藥物濃度干預后的P4軟骨細胞組),鹿茸多肽干預組分組的方法采用傳代分組法:倒置相差顯微鏡下進行觀察,當P3代軟骨細胞融合達到85%時,進行傳代(1傳3),以胰酶消化貼壁細胞,反復吹打,使細胞均勻懸浮,離心(1 500rpm,5分鐘),洗滌2次;對αMEM(含5%FBS)進行加藥,分別配制含不同濃度的PAP培養基,分別加藥使各瓶培養基藥物終濃度為PAP 5μg/mL、PAP 10μg/mL、PAP 15μg/mL;分別以上述不同含藥濃度培養基吹打混勻各瓶P3細胞,進行傳代,使藥物干預組軟骨細胞進入P4代。按實驗要求調整細胞濃度,分別接種軟骨細胞于底面積25cm2培養瓶(細胞濃度5×105/mL)、6孔培養板(置入蓋玻片)(細胞濃度5×105/mL)、96孔培養板(細胞濃度4×105/mL), 于37℃、5%CO2飽和濕度孵育箱中孵育,其中PAP分組參考劑量來源于前期實驗[3]。
2.2 各代軟骨細胞MTT比色試驗 將不同代次大鼠軟骨細胞以5×104/mL濃度接種于96孔培養板中,常規培養24小時后用含體積分數為5%FBS的αMEM培養,并分別加入PAP,使PAP終濃度為5、10、15μg/mL,加藥后分別繼續培養48小時 ,加入MTT溶液呈色。選擇490nm波長,在酶聯免疫檢測儀上測定各個孔光吸收值。
2.3 各代軟骨細胞周期分析及增殖指數檢測 將培養的待測各代軟骨細胞分別置5mL試管中,用PBS或生理鹽水洗2次,制成單細胞懸液,無水乙醇固定細胞,加入PBS調整細胞濃度為5×105~5×106個細胞加入1mL DNA熒光染料(PI),室溫下避光染色15分鐘,以流式細胞儀(Becton Dickinson FACScan,美國)分析各代軟骨細胞周期及檢測增殖指數。
2.4 各代軟骨細胞免疫細胞化法檢測各組軟骨細胞PCNA表達 將不同代次軟骨細胞接種于6孔板,孔內均預置一塊蓋玻片,常規培養48小時后取出蓋玻片,用免疫組織化學二步法檢測PCNA表達情況,結果分析:采用HPIAS21000高清晰度圖像處理系統進行圖像分析,測定PCNA陽性信號的面積密度( Sv =PCNA陽性信號面積和/窗口面積×窗口數)。
2.5 統計學方法 以上檢測均隨機取多個樣本,每個樣本多次重復。應用SPSS11.0統計軟件進行分析。進行Oneway ANOVA檢驗和Pearson相關分析,定量資料實驗結果以均數±標準差表示,P
3 結果
3.1 各組軟骨細胞MTT比色結果 MTT比色分析顯示:隨著軟骨細胞傳代培養,從P2代細胞至P4代軟骨細胞在傳代培養過程中細胞能量代謝呈下降趨勢,逐代相比OD值有顯著差異(P
圖1 各組軟骨細胞在不同觀察時間點的增殖情況(OD值)(略)
3.2 各組軟骨細胞細胞增殖指數結果 流式細胞術實驗結果顯示:隨著軟骨細胞傳代培養,從P2代細胞至P4代細胞,細胞增殖指數呈下降趨勢,分別為20.9%、16.8%、12.6%,PAP干預后的P4各組細胞增殖指數高于P4細胞,分別為19.7%、21.4%、19.4%,其中PAP 10μg/mL組促進軟骨細胞增殖的作用最高,見圖2。
圖2 各組軟骨細胞細胞周期PI值(略)
3.3 各組軟骨細胞PCNA檢測結果 免疫細胞化學法檢測各組軟骨細胞PCNA表達顯示:隨著軟骨細胞傳代培養,從P2代細胞至P4代軟骨細胞在傳代培養過程中的陽性表達呈下降趨勢,逐代相比其陽性表達有顯著差異(P
圖3 各組軟骨細胞PCNA表達(略)
A:P2(×400),B:P3(×400),C:P4(×600),D:PAP 10μg/mL(×400)
圖4 各組軟骨細胞PCNA陽性表達面積密度比值(略)
4 討論
鹿茸具有很強的壯腎陽、益精血、強筋骨的作用,是重要的滋補強壯中藥。從藥理上分析,鹿茸內含有豐富的多糖類、氨基酸類、脂肪酸類物質以及多種生長因子及其它營養成分,可以為軟骨細胞的生長提供充足的營養條件。鹿茸是一種特殊的骨組織,在春季生發季節以1~2cm/d的速度生長,故推測鹿茸中可能存在生長因子促進骨質和表皮層的增殖。目前王本祥研究室應用凝膠過濾和離子交換層析等技術,從梅花鹿茸中分離純化出一種多肽,經高效液相色譜和N-末端氨基酸分析鑒定為單一多肽,氨基酸組成分析證明,PAP是由68個氨基酸殘基組成,分子量為7 200[4]。此多肽主要含有纈氨酸、丙氨酸、賴氨酸和甘氨酸,沒有半胱氨酸。實驗證明PAP具有很強的促進骨、軟骨細胞增殖的作用[5-6]。實驗所見軟骨細胞在體外傳代培養過程中細胞增殖能力呈下降趨勢,本實驗從MTT比色分析細胞能量代謝,流式細胞術考察其增殖期細胞含量,免疫細胞化學法檢測增殖細胞核抗原表達等方面看到從P2代細胞至P4代細胞,軟骨細胞增殖能力明顯下降,如何以生長因子刺激促進軟骨細胞的增殖能力對于將軟骨細胞作為種子細胞用于軟骨組織工程具有積極意義。生長因子對靶細胞的調控與其劑量密切相關,因此,確定能產生最佳調控軟骨細胞增殖的PAP劑量至關重要。本文在預實驗的基礎上用MTT比色試驗所篩選的不同劑量的PAP能不同程度地促進軟骨細胞的能量代謝。說明PAP能促進軟骨細胞增殖,而且以10μg/mL濃度為最佳。PCNA是一種僅在增殖細胞中合成或表達的核內多肽,其表達和合成與細胞周期有關。主要表達增殖細胞的S期、G1期、G2初期,因此成為檢測細胞增殖活性最為有效的標志之一。本實驗免疫組化結果證實,PAP以10μg/mL濃度時軟骨細胞表達致密的棕褐色顆粒最多,其他組則較少,說明PAP可通過促進PCNA表達來調控DNA復制。細胞周期與細胞中DNA含量密切相關,DNA含量隨著細胞周期各期而發生變化。當細胞受到某些因素刺激時,可使DNA含量發生變化,從而引起細胞周期發生改變。細胞增殖指數是S期與G2期DNA含量之和與S期、G2及G1期DNA含量之和的比,它是反映細胞增殖的重要指標之一。本實驗FCM結果顯示,PAP能顯著提高軟骨細胞增殖指數,且以10μg/mL濃度時最明顯。綜上所述,PAP不僅具有顯著的生物活性,可以促進軟骨細胞的增殖,而且還能阻止軟骨細胞在連續體外培養過程中的增殖衰老趨勢,本實驗可以為優化組織工程中的種子細胞提供一定理論和實驗依據,有關PAP抗軟骨細胞傳代老化的實驗有待進一步探討。
參考文獻
[1] Hu DN,Yang PY,Ku MC,et al.Iso1ation and cultivation of human articular chondrocytes [J].Kaohsiung J Med Sci,2002,18 (3):113-120.
[2] 陳曉東,林建華.大鼠軟骨細胞分離培養與鑒定[J].福建中醫學院學報, 2006,16(6),27-29.
[3] 林建華,修忠標.鹿茸多肽對骨髓基質干細胞體外增殖的影響[J].中華實驗外科雜志,2005,22(7):821-828.
[4] Zhang ZQ,Zhang Y,Wang BX,et al.Purification and Partial Characterization Of Anti-inflammatary Peptide from Pilose Antler of Cervus Nippon temminck[J].Acta Pharmaceutica Sinica ,1992,27(5):321-324.
1、人參和鹿茸
人參和鹿茸片搭配在一起泡茶喝效果特別好,人參和鹿茸片都是具有滋補功效的中藥材,它們搭配在一起泡茶喝會讓滋補功效更加出色,人參能補中益氣,鹿茸片則能補益精血,它們一起泡茶喝,對人體氣血虧虛或體質虛弱都有明顯緩解作用。
2、人參和枸杞
人參和枸杞也是泡茶喝的理想搭檔,它們搭配在一起泡茶喝,不但能讓人體吸收豐富營養還能增強人體免疫力,人生中的人參皂苷和枸杞中的枸杞多糖被人體吸收以后都能促進免疫細胞再生,增強人體免疫功能,出現免疫力低下是集食用人參和枸杞泡茶喝就能讓情況有所好轉。
3、人參當歸和黃芪
人參還可以和當歸與黃芪等中藥材搭配在一起泡茶喝,當歸能補益氣血,提高人體造血功能,而黃芪則能緩解人體中氣不足,人生又是一種能大補元氣的中藥材,它們搭配在一起泡水喝能有效緩解人類體虛,能增強人體素質提高人體健康水平。
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1、鹿茸:雄鹿的嫩角沒有長成硬骨時,帶茸毛,叫做鹿茸。是一種貴重的中藥,用作滋補強壯劑,對虛弱、神經衰弱等有療效;
2、鹿胎盤:動物之極品,鹿一生充滿活力,無明顯的體態衰老現象,這一切皆歸功于其胎盤中的生命原動力。同時鹿胎中還含有鹿胎蛋白、氨基酸、維生素、礦物質及人體必需的微量元素。加速新陳代謝,清除體內毒素沉積,使人體保持年輕狀態,有明顯的美容養顏,延緩衰老的作用;
3、鹿骨:補鈣護鈣二合一,骨骼健康添營養,鹿骨含有人體骨骼形成所需全部營養物質,是天然活性鈣的重要來源,且含
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