時間：2023-05-29 18:25:18
開篇：寫作不僅是一種記錄，更是一種創造，它讓我們能夠捕捉那些稍縱即逝的靈感，將它們永久地定格在紙上。下面是小編精心整理的12篇蜂膠的作用，希望這些內容能成為您創作過程中的良師益友，陪伴您不斷探索和進步。
1、蜂膠與普通牙膏相比更具有保健牙齒的功效。里面含有的蜂膠成分含有一定的藥理作用。還能夠滋養牙齦，預防牙齦炎癥的發生。
2、蜂膠牙膏具有很強的過敏殺菌和清潔牙齒的作用。如果平時刷牙出血可以防治牙齦出血以及牙齒敏感酸痛的情況。
3、對于平時口腔腫痛，以及經常有口腔潰瘍的人群也特別適用。可以有效的清潔牙齒使口腔變清新。達到消腫除痛以及預防口腔潰瘍的發生。
（來源：文章屋網 ）
【摘要】 目的 探討蜂膠黃酮對腦缺血再灌注損傷的保護作用。方法 SD大鼠分為假手術組、模型組及蜂膠黃酮高、中、低三個劑量組，大腦中動脈栓塞(MCAO)制作模型，檢測各組大鼠腦組織含水量和腦梗死體積，腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)的含量。結果 與模型組比較，蜂膠黃酮三個劑量組腦含水量明顯降低(P
【關鍵詞】 蜂膠黃酮;腦缺血再灌注;自由基
蜂膠乙醇提取物(EEP)可以改善血管的彈性和滲透性，舒張血管、清除血管內壁積存物〔1〕，具有抗氧化、清除自由基和對缺血再灌注損傷保護等作用〔2〕。然而蜂膠黃酮對缺血性腦損傷是否具有保護作用報道極少，本研究復制大鼠缺血再灌注損傷模型，通過腦組織含水量、腦梗死體積和腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(CAT)和丙二醛(MDA)的測定來探討蜂膠黃酮防治腦缺血再灌注損傷的機制，為腦缺血防治提供實驗依據。
1 材料與方法
1.1 材料 SOD、CTA、MDA劑盒均購自南京建成生物制劑研究所，其余試劑均系國產分析純;蜂膠黃酮由黑龍江中醫藥大學生物化學教研室提供。SD大鼠，雌雄各半，體重250～300 g，由哈爾濱醫科大學動物中心提供。
1.2 實驗儀器 紫外可見分光光度計(WF2800D3A，北京第二光學儀器廠)，超聲波細胞粉碎機(JY98Ⅲ，寧波科生儀器廠)，高速冷凍離心機(D37520型，德國HERAEUS公司)。
1.3 動物分組 150只大鼠隨機分為5組，即假手術組、模型組、蜂膠黃酮高、中、低劑量組(200、100、50 mg/kg)，每組30只。除假手術組不插線外，其余4組造模。蜂膠黃酮各劑量組每天灌胃1次，連續10 d。術前1 d再給藥1次。
1.4 動物模型 根據Longa等〔3〕的方法制備大鼠缺血再灌注損傷模型。大鼠稱重，6%水合氯醛(350 mg/kg)腹腔麻醉，頸部正中切開，分離右側頸總動脈、頸外動脈、頸內動脈。結扎頸總動脈近心端、頸外動脈起始端后，在頸總動脈處剪 “V”形口，沿頸總動脈插入直徑為0.235 mm的標記魚線。經頸內動脈向顱內插至大腦中動脈分叉處，插入深度為18～20 mm，將線與頸內動脈一起結扎。術中維持體溫。再灌注時外拉線使標記端回至頸外動脈，拔除插線，結扎頸外動脈。假手術組不插線外，其余同前。大腦中動脈栓塞后2 h恢復血供，神經行為學評分參照ZeaLonga 5分制標準〔3〕，術后出現左前肢屈曲，行走時向左側轉圈即視為造模成功，然后保溫常規飼養，至24 h斷頭處死取材。
1.5 腦組織含水量的測定 大鼠造模24 h后斷頭取腦，稱量兩側半腦濕重。再置于烘箱中，100℃烘烤24 h至恒重，稱量干重，計算含水量。腦組織含水量=(濕重-干重)/濕重×100%。
1.6 腦梗死體積測定 斷頭取腦，將大腦作連續2 mm冠狀切片，共5片，然后將腦片放入2%TTC磷酸鹽緩沖液中37℃恒溫孵育30 min，正常腦組織染為紅色，梗死灶呈白色。用電子天平稱重著色和未著色部分，計算腦片中梗死部分的質量百分比，以此反映梗死體積比。
1.7 腦組織勻漿SOD、CAT活性、MDA含量檢測 將大鼠立即斷頭取腦，切取缺血側MCA區腦組織0.1 g，用0℃生理鹽水制成10%的腦組織勻漿，按SOD、CAT、MDA試劑盒說明書檢測腦組織中SOD、CAT、MDA含量。
1.8 統計學處理 所有數據均以x±s表示，應用SPSS11.5版統計學軟件進行處理。各組間比較采用單因素方差分析，成組數據比較采用t檢驗。
2 結 果
2.1 腦組織含水量 左腦組織含水量各組間比較無差異，模型組右腦組織含水量明顯高于假手術組(P
2.2 腦梗死體積 模型組腦組織梗死體積大于假手術組(P
2.3 腦組織SOD、CAT活力及MDA含量檢測 與假手術組相比，腦缺血再灌注模型組腦組織MDA含量增加(P
3 討 論
腦組織一定時間缺血后恢復血流供應，功能不但未見改善相反出現缺血性損傷進一步加重的現象稱為腦缺血再灌注損傷。腦缺血再灌注后，引起神經細胞的死亡和凋亡，導致腦組織的損傷和功能障礙。腦缺血早期，內皮細胞間隙緊密連接疏松開放，通透性增高，血腦屏障損害，引起腦組織的潴留和腦水腫。本研究結果表明蜂膠黃酮有維護血腦屏障的功能，減輕腦水腫程度，保護腦缺血損傷。局部腦血流降低的程度和缺血持續的時間決定腦缺血損傷的程度。本研究結果發現蜂膠黃酮治療組梗死區明顯小于模型組。
再灌注使損傷加重的主要機制之一是自由基的產生〔4〕。研究表明，在缺血性腦損傷中可產生大量氧自由基(OFR)，而再灌注期間OFR生成加劇〔5〕。OFR損傷細胞內最敏感的靶位就是磷脂膜多價不飽和脂肪酸，引發脂質過氧化反應，使神經細胞損傷甚至壞死。尋找有效的自由基清除劑，保護缺血半暗帶內神經元免受進一步損害及促進病變恢復是實施腦保護治療、改善缺血性腦損傷預后的重要措施之一〔6〕。脂質過氧化代謝產物MDA的含量可以反應機體受自由基攻擊的程度。 SOD是體內主要自由基清除酶，能夠有效地清除并終止超氧陰離子引發的連鎖反應。CAT 末端氧化酶，其功能是催化細胞內過氧化氫分解，防止膜脂過氧化。MDA顯著升高，說明腦組織缺血后氧自由基脂質過氧化反應增強;SOD、CAT下降可能是增強的脂質過氧化反應消耗了過多的抗氧化酶，氧化抗氧化平衡被打破。大量生成的OFR首先破壞脂質生物膜，使細胞膜對鈉離子及大分子物質的通透性增加，神經元發生細胞毒性水腫和興奮性遞質的釋放;線粒體膜受損，能量代謝障礙，并使其內部的鈣離子溢出，同時DNA鏈斷裂，引起染色體的畸變和斷裂，以上共同作用最終使神經元死亡。尤其重要的是它可使初始缺血損傷不嚴重的神經元發生不可逆的壞死，誘導凋亡的發生。本研究表明蜂膠黃酮可以減輕自由基對腦組織的損傷，機制可能與其分子中含有酚羥基有關，該結構可能是清除自由基的結構基礎。
總之，蜂膠黃酮可減少腦缺血后腦組織水腫，縮小梗死體積，增加SOD、CAT活性，降低MDA含量，增強對自由基的清除，減輕脂質過氧化反應，保護神經細胞膜的完整性和穩定性。
參考文獻
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新聞回顧
近日，有“免疫軟黃金”之稱的蜂膠被輿論推到了風口浪尖。據中國蜂產品協會公布的數字顯示，我國蜂膠每年的產量約300噸，但實際銷量卻達到了1000噸，這也就是說，市場上售賣的蜂膠有近七成涉嫌造假。
蜂膠小知識
蜂膠是蜜蜂為了修補蜂巢而分泌的黃褐色或黑褐色的粘性物質。
性味歸經：性平，味酸、甘，歸肝、脾經。
功效：散結止痛、生肌斂瘡。內服可補虛弱、化濁脂、止消渴，治療體虛早衰、高脂血癥、糖尿病等；外用能解毒消腫，治療皮膚皸裂、燒燙傷、雞眼、胼胝、尋常疣等。
用法用量：內服時，每次取1~2克，制成片劑、膠囊或用酒浸液；外用時，每次取適量，制成酊劑或軟膏涂敷。
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修補蜂巢的膠水
蜂膠，其實是蜜蜂從植物芽孢、樹皮或者樹干上采集的樹脂，再在其中混入其上腭分泌物以及部分蜂蠟加工而成的一種具有芳香氣味的膠狀固體物質。蜜蜂將它當作膠水，用來修補蜂巢的縫隙或孔洞。蜂巢是蜂群生活和繁殖后代的場所，一個小小的蜂巢里可能會住著數萬只蜜蜂，而且里面還儲藏有大量蜂蜜、蜂王漿等營養豐富、容易滋生細菌的蜂產品，所以蜂巢內必須保持無菌的環境，否則不僅幼蟲、幼蜂及蜂后的生存會受到影響，而且還有可能導致蜂產品失去活性或者變質。其次，用來封蓋容易腐爛的物質，比如被蜜蜂蜇死的敵害尸體等，以防病菌傳染，從而保持蜂巢的清潔無菌。
奇效佳品
蜂膠集植物分泌物與動物分泌物于一體，成分相當復雜。現代研究發現，其主要成分是黃酮類化合物，此外還含有多種酚類、醇類、酸類、脂類化合物，少量的鐵、鈣、鉻、硅、錳、鉛、錫、鎳、鋁、銅、鉬、鈦、鉀、鋅等微量元素和維生素A、維生素B、多種氨基酸、酶、阿魏酸等，具有很強的抗菌消炎、增強免疫功效、抗衰老以及降血糖、抗腫瘤、促進組織再生、防止血管系統疾病、治療胃腸疾病等功效。
1、抗菌消炎 蜂膠中含有大量的黃酮類、萜烯類物質，它們對各種細菌、真菌、病毒等具有顯著的抑制和殺滅作用，能夠用來治療腳氣、濕疹、各種潰瘍、牙周炎、鼻炎、胃炎、泌尿系統感染、痔瘡、腹瀉等疾病。同時還不會不破壞體內的有益菌落。
2、增強免疫力 蜂膠能夠顯著提高機體的免疫功能和抗病能力，對預防感冒、衰老以及消除老年斑、色素沉積有很好的療效。
3、抗衰老 機體的衰老實質是一個“氧化”的過程，機體在進行新陳代謝的同時，會不斷產生自由基，而過剩的自由基會作用于血液等脂類物質，或者細胞內的遺傳物質DNA，使細胞衰老，甚至癌變或死亡等。而蜂膠中的黃酮類、萜烯類物質具有很強的抗氧化性能，不但能防止細胞氧化，還能顯著提高機體內具有清除自由基作用的超氧化物――歧化酶（SOD）的活性。另外，蜂膠中的肉桂酸衍生物和維生素E、C、A以及微量元素硒、鋅等也都有一定的抗氧化作用。這些物質相輔相成，共同發揮抗氧化功能，使蜂膠能有效防止細胞老化、減少色素形成、排除體內毒素等，使人身體強健、容顏煥發、青春常駐。
4、降低血糖 首先，蜂膠中的黃酮、萜烯類物質以及微量元素具有明顯的降低血糖的作用；其次，蜂膠中的黃酮類物質、多糖物質能夠調節機體代謝；再次，在注射胰島素或服用降糖藥后，蜂膠還可以提高藥效，從而明顯地降低血糖；最后，蜂膠可以減少自由基對細胞的傷害，防止多種并發癥。
5、抗腫瘤 蜂膠能夠直接抑制、殺滅癌細胞，對腫瘤和息有很好的預防和治療效果。
6、促進組織再生 蜂膠可以快速止血，加速傷口的愈合，對創傷、燒傷、燙傷等具有明顯的治療作用。
7、防治血管系統疾病 蜂膠中的黃酮類物質，可以活血化瘀、軟化血管、阻止血小板凝聚、改善微循環，對血管硬化、梗塞、血栓、高血脂等都有很好的預防和治療效果。
8、治療胃腸疾病 蜂膠能夠在胃腸粘膜上形成一層酸不能滲透的薄膜。這層薄膜作用于十二腸潰瘍，既能殺菌抗炎，又能保護和促進受損組織更新，同時還能促使潰瘍部份愈合。
此外，蜂膠還具有明顯的安神、消炎、止痛、止癢、麻醉、抗輻射等作用。
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來源不同，功效各異
蜂膠、蜂蜜與蜂王漿的來源各不相同，功效也不大相同。蜂膠的原料是膠源植物的分泌物――樹脂類物質，所以蜂膠的主要成分是黃酮類化合物，具有抗菌、消炎、抗氧化、增強免疫力等功效。
蜂蜜的原料源于花源植物的蜜汁或者昆蟲分泌的蜜露，所以蜂蜜的主要成分是葡萄糖和果糖。李時珍在《本草綱目》中說：“蜂蜜益氣補中，止痛解毒，除百病，和百藥，久服強志輕身，不老延年。”
而蜂王漿則是工蜂咽下腺分泌的一種以氨基酸、蛋白質、王漿酸為主要成分的超級營養物質，它主要是由負責撫育幼蜂、照顧蜂王的工蜂通過食用蜂花粉、蜂蜜而進行分泌轉換而成。蜂王由于長期食用蜂王漿，壽命可達到5~6年，而蜜蜂的一般壽命只有1~2個月。蜂王漿延年益壽的功效可見一斑。
因此，蜂膠是蜜蜂的藥品，而蜂蜜、蜂王漿則是蜜蜂的食物，其中蜂王漿更是蜂王賴以形成和終生的食物。
兩招辨真假
真品蜂膠是不透明的膠狀固體，呈黃褐色或黑褐色，具有芳香氣味，吃起來味道略苦，還帶有少許辛辣味；它不溶于水，卻能溶于酒精中。真假蜂膠可以用以下幾個方法來鑒別：
一嘗味道：如果蜂膠味道苦且略帶辛辣味，那表明這是真品。如果味道發咸，則可能是加了醬油；如果發甜，則可能是加了蜜或糖，這兩種味道的蜂膠都是偽品。
二滴水試真假：在杯子里倒上少許溫白開水，把蜂膠液滴在水里。如果蜂膠馬上沉到杯底，且不散開，同時水面浮起一層薄薄的白色乳狀物，攪動后變成白色混濁狀的，說明這是真品；如果攪動后不變色的，那表明是偽品。把水倒掉，如果杯底有蜂膠殘留物，用水不易洗掉，用酒一擦就掉的，表明是真品；如果杯底沒有殘留物的，則為偽品。
服食有計較
蜂膠是一種天然的抗生素，它是保健品不是藥品，所以大家可以放心食用。平時，我們常見的吃法有這么幾種：
1、對于濕性的蜂膠，比如蜂膠液，可以滴在饅頭等主食上，與主食一起吃。
2、對于膠囊的蜂膠，比如蜂膠軟膠囊，最好早晚空腹各吃一粒（或兩粒），用溫水送下。這是因為早餐前半個小時空腹服用蜂膠，可以迅速調動免疫系統功能，清除昨晚積蓄的毒素；晚上睡覺之前服用蜂膠，可以清除白天身體受到的污染。
3、如果想要改善蜂膠的口味，可以把蜂膠加在牛奶、咖啡、蜂蜜等飲品中一同服用。這樣既能改善口味，又能避免蜂膠的粘壁現象。
4、服用蜂膠如果想要達到最佳效果，最好在服食前先在嘴里含一口水，再將蜂膠直接滴入口中和口里的水充分混合。
5、空腹服用蜂膠的效果最佳。但是糖尿病患者在服用蜂膠時，最好同服用降糖藥一樣，在飯前半小時服用。
五大禁忌記心中
1、未滿周歲的孩子不可食用。嬰兒的抵抗力較差，如果給嬰兒食用蜂膠可能會影響嬰兒免疫系統正常發育。
2、對蜂膠有過敏反應的人不能食用。研究發現，蜂膠中含有的原有桂皮酸、桂皮醇、桂皮醛、苯乙烯基桂皮酸鹽和楊芽黃素等都具有致敏性。但是蜂膠的過敏反應屬于遲發型變態反應，不像青霉素那樣會有生命危險，所以人們不必過于擔心。但是，在服用蜂膠前，最好先做過敏反應實驗：在手腕處滴上一滴蜂膠，如果過一天后沒有出現紅腫、不起水泡或無瘙癢感，才能服用蜂膠。
3、孕婦慎服。蜂膠中的某些生物活性物質會刺激子宮，如果食用蜂膠不當會引起宮縮，干擾胎兒正常的生長發育。所以不懂得蜂膠食用方法的孕婦最好不要食用蜂膠。
4、不宜與西藥同服。蜂膠與中藥同服，可以幫助中藥發揮更好的治療作用。但是蜂膠不宜與西藥一起服用，這是因為蜂膠有加強藥效的作用，如果與毒副作用大的西藥一起服用，會同時加大西藥的毒副作用。蜂膠最好與西藥分開服用，二者間隔半小時即可。
5、不宜長期食用。蜂膠的成分十分復雜，受到加工工藝的限制，蜂膠中普遍存在的重金屬可能難以根除。如果常年服用，同樣可能會對身體造成損害。
藥用小驗方
鼻子不通：用棉花棒蘸上蜂膠，涂抹在鼻子里。
牙周病：直接把蜂膠點在患有牙周病的牙齦上，嚴重時，可以每2~4小時點一次。
【關鍵詞】蜂膠；醇法提取；總黃酮；含量測定
【中圖分類號】R313 【文獻標識碼】A 【文章編號】1004-7484（2012）13-0062-02
蜂膠（propolis）是蜜蜂從植物幼芽與樹干上采集的樹膠與其上顎腺分泌物和蜂蠟等混合加工而成的一種具有芳香氣味的膠狀固體物。它主要由蜂膠香脂、蜂蠟、樹脂、花粉等組成[1]。蜂膠的化學成份極為復雜，黃酮類化合物是蜂膠主要的功效成份。蜂膠的化學成分由蜜蜂采集的膠源植物決定，植物的種類繁多，不同地區蜂膠中分離出的化學成分不盡相同[2]，但黃酮類化合物始終是主要成分；目前仍以總黃酮的高低來確定蜂膠的質量，藥典中也以兩個特征性黃酮：白楊素、高良姜素的含量來確定蜂膠的質量[3]，黃酮類化合物是蜂膠中發揮保健營養功能的重要物質基礎。本研究對湖北省神家架林區產蜂膠的化學成分進行了深入的研究，分離并鑒定了15個黃酮類化合物，主要為黃酮（醇）和二氫黃酮（醇）類化合物。
1 材料和儀器
蜂膠于2012年5月采自湖北省神家架林區， 由神農架玉泉綠色產品有限公司提供，經武漢工業學院生物及制藥工程學院陳平教授鑒定為蜂膠。
XRC-1型顯微熔點測定儀；ZAB-2F型質譜儀（英國VG公司）質譜儀；Varian Inova 500 MHz核磁共振儀； KQ-500DE型超聲波清洗器（江蘇昆山超聲儀器公司）； RE- 52AA旋轉蒸發儀（上海亞榮公司）。薄層層析硅膠板和柱層析硅膠均為青島海洋化工廠產品；柱層析用凝膠Sephadex LH-20為Pharmacia（美國） 產品；反相C18色譜填料為Mitsubishi（日本）產品；提取分離時所用有機試劑均為分析純，北京北化精細化學品公司生產。
2 提取分離及測定
2.1 蜂膠總黃酮的提取【4】 將蜂膠冷凍 5 h后進行粉碎，過20目篩，稱取86.51g，加入1升甲醇，潤濕浸泡24小時，超聲提取30分鐘，抽濾；濾渣再加入1升甲醇，浸泡24小時，超聲提取30分鐘，抽濾。合并甲醇液，減壓回收甲醇至干；干浸膏粉碎，加入氯仿懸浮浸泡，冷藏24小時，抽濾去除溶液層，濾渣干燥得紅褐色粉狀（如圖1）提取物30.36g。提限率為35.09%。
2.2 黃酮類化合物的測定 將上述提取物加入少許甲醇完全溶解后，加入硅膠拌樣，進行硅膠柱層析分離，以氯仿-甲醇系統梯度洗脫，經薄層色譜分析，合并相似流分，再經反復硅膠柱層析（氯仿-甲醇及石油醚-乙酸乙酯系統）以及sephadex LH-20、反相C18柱等進行純化，得到15個黃酮類化合物。分類見表1：
3 討論
蜂膠是由蜜蜂將采自植物的枝條、葉芽及愈傷組織等的分泌物與上腭腺、蠟腺等的分泌物同少量花粉混合后所形成的黏性物質。蜂膠是一種天然活性物質，具有十分廣泛的生物學作用，成為近年來國內保健食品領域研究的一個熱點。現代研究表明[5]，蜂膠具有抗菌消炎、抗病毒、抗氧化、抗腫瘤、增強免疫力、軟化血管、調節血脂、降血糖、改善微循環等廣泛的生物學作用。含有大量的黃酮類、萜烯類化合物是蜂膠的重要特征，蜂膠的大部分生理及藥理功能都與此類化合物有密切關系。
在2010版藥典對蜂膠的含量測定控制方法為高效液相法控制白楊素及高良姜素的含量；但蜂膠的黃酮化合物類型及含量差異較大，如僅以白楊素及高良姜素等2個黃酮來控制質量，不能代表蜂膠中黃酮的整體組成及保健作用。本次課題以蜂膠的湖北神農架林區產蜂膠為實驗對象，研究其主要黃酮類化合物的組成，并準備在后續的試驗中測定相應黃酮的含量及其降血糖、調節血脂、抗衰老等功能作用，為深入研究和合理開發鄂產蜂膠的功能產品提供質量標準、技術路徑和質量標準。
參考文獻
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作者簡介：
周威（1973-），男，湖北武漢人，副教授，主要從事天然藥物化學成分研究。
基金項目：
武漢市科技攻關項目（編號：201220822276）
目的 研究蜂膠提取物對不同齲敏感者口腔變形鏈球菌臨床分離株的產酸能力的影響。方法 以BHI液體培養基為溶劑，分別配制pH=7.0的5 g/L 和1.25g/L水溶性蜂膠溶液，1.5625 g/L醇溶性蜂膠溶液，并以空白液體培養基作為對照，加入高齲組，無齲組，國際標準株變形鏈球菌，厭氧培養48 h 后離心，用精密酸度儀測定上清的pH值，計算出pH，并進行比較。結果 高齲組和國際標準株產酸能力明顯高于無齲組；醇溶性蜂膠溶液和水溶性蜂膠溶液皆可使變鏈菌產酸能力降低，蜂膠各組與對照組相比差異均有統計學意義(P< 0.05) 。醇溶性蜂膠溶液和5 g/L 水溶性蜂膠溶液降低產酸能力的作用比較差異無統計學意義(P> 0.05)，但是均明顯高于1.25g/L水溶性蜂膠溶液；蜂膠對高齲組和無齲組細菌的影響沒有顯著性差異。結論 蜂膠提取物影響變形鏈球菌的代謝，使變形鏈球菌產酸能力降低。
【關鍵詞】 蜂膠; 變形鏈球菌; 齲敏感；產酸
ABSTRACT
Objective To study the effect of propolis on acid producing ability of clinical isolates from strptococcus mutans of the patients with difference caries susceptibility. Methodss Strptococcus mutans from caries-active group，caries-free group and international standard strain group were put into BHI culture medium with 5g/L and 1.25g/L proplis extract in water，into BHI with 1.5625g/L proplis extract in ethanol and into BHI culture medium which was taken as the control; after anaerobic culture for 48 hours，centrifugation was made，the pH value of supermatant in each solution was detected with acurate acidity tester and pH was calculated; the results were compared. Results Acidogenencity of caires-active group and of international standard strain group was much higher than that of caries-free group; proplis extract in water or in ethanol decreased the acidogenecity of streptococcus mutans; the comparison of each group with proplis to the control was of statistical significance (P＜0.05); the effect comparison between the solution with proplis extract in ethanol and the solution with 5g/L proplis extract in water in decreasing acidogenecity was of no statstical significance while their effects in decreasing acidogenecity were obiously stronger than that of the solution with 1.25g/L proplis extrat in water; the effect of proplis in caries-active group was without significant difference from that in caries-free group. Conclusions Proplis extract can affect the metabolism of streptococcus mutans and decrease its acidogenecity.
KEYWORDS proplis streptococcus mutans caries susceptibility
acidogenecity
齲病是世界范圍內的常見病和多發病，其發病率高，危害性大，被世界衛生組織列為要重點防治的三大疾病之一［1］。變形鏈球菌（變鏈菌）是公認的主要致齲菌之一。近年來對蜂膠的研究比較多，本實驗通過觀察蜂膠對不同齲敏感患者口腔變形鏈球菌臨床分離株產酸的影響，從而探討蜂膠作為一種生物防齲制劑的可行性，為其臨床使用提供實驗依據。
1 材料和方法
1.1 材料 蜂膠：樂山錫誠集團提供。細菌: 自行分離、鑒定自不同齲敏感患者口腔中的變形鏈球菌63株，其中高齲組34株，無齲組29株（高齲者dmft≥6，無齲者dmft＝0）。
國際參考菌株變形鏈球菌（S．mutans）ATCC 25175（血清型C），由四川大學華西醫學院口腔生物工程重點實驗室提供。
1.2 菌液的制備 將甘油保種變形鏈球菌臨床分離株與國際標準株分別接種于MS固體培養基，37℃，微需氧復蘇48h，檢查生長狀況，鏡檢鑒定無污染后，挑取單個菌落轉種于BHI 液體培養基增菌，厭氧（80%N2、10%H2、10%CO2）培養24h，涂片檢查為純培養后，將菌液在4℃下以3000r／min離心15min，棄上清，收集細菌，無菌生理鹽水洗菌兩次，用無菌生理鹽水調整為于紫外分光光度計540 nm處吸光度A=1.0的菌懸液，備用。
1. 3 試劑的制備 以pH為7.0的BHI 培養基為溶劑，配制醇溶性蜂膠溶液(1.5625g/L)，水溶性蜂膠溶液(5g/L 和1.25g/L)，調定各培養基的pH值為7.0 。
1. 4 實驗方法 實驗為4組：5 g/L蜂膠水溶液組，1.25 g/L蜂膠水溶液組，1.5625 g/L蜂膠醇溶液組，BHI培養液組做為對照。取各菌株的菌懸液，按菌液與液體培養基1∶10 (v/v) 比例接種細菌，37℃厭氧培養（80%N2、10%H2、10%CO2）48 h， 3000rpm，離心15 min，收集上清，采用 pHS - 3C精密酸度計，測定培養物上清的終末pH 值，并計算pH的變化值pH值（初始pH 值－終末pH 值）。
1. 5 統計學方法
采用SPSS 11.0統計軟件中的two-way ANVOA對不同細菌的產酸能力即pH值，進行統計分析(а=0.05)；并采用kendall相關分析法檢測蜂膠與細菌產酸能力之間的相關性。
2 結果
蜂膠對變鏈菌產酸能力的影響結果見表1。
細菌F=65.832，P＜0.05，培養基F=98.01，P＜0.05，細菌與培養基的交互性F=1.192，P＞0.05。
表1 在各組培養基中不同齲敏感患者變形鏈球菌的產酸能力（略）
統計分析得出：無論添加蜂膠與否，國際標準株和高齲組變鏈菌的產酸能力沒有顯著性差異，但是它們的產酸能力均高于無齲組變鏈菌的產酸能力(P
采用kendall相關分析法得出：kendall等級相關系數為-1.0，P值為0.042＜0.05，說明蜂膠與變鏈菌的產酸能力成負相關。因此可以可以得出蜂膠可以抑制變鏈菌的產酸能力。
3 討論
蜂膠是一種天然活性物質，具有十分廣泛的生物學作用，成為近年來國內藥理學領域研究的一個熱點。蜂膠中含有大量黃酮類、芳香酸、脂肪酸及萜烯類化合物，具有廣譜抗菌作用。實驗表明，蜂膠對革蘭陽性細菌的抗菌作用較革蘭陰性細菌為強［2］。
變形鏈球菌是一種革蘭氏陽性兼性厭氧菌，它能產生有機酸，使牙體硬組織發生無機物的酸蝕脫礦，有機物崩解，最終導致齲病的發生［3］。對于蜂膠的防齲作用已有一些報道。Koo 等［4］報道蜂膠醇溶液對口腔中10種細菌皆有抑菌作用，特別提出蜂膠醇溶液對變形鏈球菌和遠緣鏈球菌的抑菌作用很強；王晶等［5］研究得出醇溶性蜂膠溶液和水溶性蜂膠溶液都可以使變形鏈球菌產生的乳酸量顯著減少。
本實驗得出蜂膠醇溶液和水溶液均可以使變形鏈球菌的產酸能力降低，這與參考文獻中的結果一致。高齲組細菌產酸能力高于無齲組的細菌，可能是因為高齲組存在著產酸能力強的菌株。但是蜂膠對于高齲組和無齲組的細菌的影響沒有顯著性差異，這說明蜂膠對不同菌株產酸作用的抑制機制可能都是一致的。蜂膠做為一種生物防齲材料，是具有可行性的，但是蜂膠的化學成分隨產地和蜜蜂種類不同而異，具有高度的復雜性和多樣性，對于蜂膠抑制變鏈菌產酸的具體機制、蜂膠的其他防齲性能以及不同蜂膠之間防齲能力的差異性，還需要進一步研究。
參考文獻
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近些年，在世界各國掀起回歸自然的熱潮中，蜂產品備受人們的推崇。在歐洲、美國、日本等經濟發達國家和地區，對蜂產品的需求量日益增加，因為科學使用蜂產品在保健養生、防病治病方面的作用日漸突出。例如在日本，蜂產品的消費量增加了3倍以上，被認為是日本人均壽命延長的六大原因之一。我國利用蜂產品健身、治病的歷史可追溯到兩千年之前。明代李時珍在《本草綱目》中記述：“蜂蜜其入藥之功有五：清熱也、補中也、解毒也、止痛也、潤燥也……與甘草同功。”傳統的中成藥“煉蜜為丸”，用的就是優質的蜂蜜。古往今來，蜂蜜和中醫、中藥結下了不解之緣。
目前使用較多的蜂產品一般可分為四大類：蜂蜜類、蜂王漿類、蜂花粉類和蜂膠類。另外，蜂產品還包括蜂蠟、蜂毒、蜂蛹、蜂幼蟲等。本刊曾介紹了蜂王漿的有關知識，下面再談談蜂膠和蜂花粉的保健功效。
蜂膠是蜜蜂采集樹芽、樹干上的樹膠與其上顎腺分泌物和蠟腺分泌的蠟質調制而成的具有芳香性、不透明的膠狀固體。蜜蜂把蜂膠涂抹在蜂箱的所有角落和表面部位，使蜜蜂幼蟲能在蜂箱里正常生長發育。另外，蜂膠可使營養極為豐富的蜂王漿、蜂花粉、蜂蜜等在蜂箱內保存較長時間而不腐敗變質。由于有了蜂膠，使得蜜蜂在漫長的歲月和嚴酷的生存環境中得以生息繁衍，所以人們稱蜂膠是蜜蜂王國的保護神。
蜂膠的防腐作用引起了科學家的興趣。研究發現，蜂膠的成分十分復雜，目前已知的有300多種有效物質，包括黃酮類、萜（音“貼”）類、芳香類等化合物以及多種酶和氨基酸、維生素等等。科學家們發現，蜂膠對細菌、真菌、霉菌和病毒有較強的殺滅作用，是一種不可多得的天然廣譜抗菌物質，又是一種理想的抗氧化劑和免疫增強劑，具有很高的藥用保健價值。
蜂膠中的黃酮類化合物具有很強的抗氧化作用，能軟化血管，防治動脈硬化，還有降血脂、降膽固醇等作用，對心腦血管疾病患者有明顯的保健功效。蜂膠中的多種活性酶和萜類物質可增強正常細胞膜活性，預防細胞癌變或癌細胞轉移。接受手術或放、化療的患者服用蜂膠后，可增強機體抵抗力，還可有效防止放射性粘膜炎的發生與發展，減少放、化療的副作用。人們無意中發現，世界各地的養蜂人很少患癌癥，這也從一個側面證明了蜂膠等蜂產品的抗癌作用。
在現代文明社會，糖尿病成為威脅中老年人健康的常見病、多發病。研究發現，蜂膠含有的多種生物活性物質有促進胰腺功能、增強分解利用葡萄糖而達到降低血糖的效果。有報道認為，糖尿病患者在治療過程中堅持服用蜂膠，可有效延緩糖尿病的進程及并發癥的發生。還有研究發現，蜂膠對慢性腸胃炎患者有療效。蜂膠具有良好的成膜性，能夠在粘膜上形成一層保護膜，從而對胃及十二指腸潰瘍有治療作用。蜂膠還對多種皮膚病有療效，具有抗菌消炎、局部止血止痛等作用，能促使上皮組織增生和肉芽生長,改善皮下組織血液循環，限制疤痕形成。蜂膠還可營養皮膚，保護皮膚不受酸堿等化學物質傷害，具有護膚美容的效果。
與其他類型的蜂產品比較，蜂膠的作用側重于藥效方面。蜂膠的劑型可分為膠囊類（有軟膠囊和硬膠囊兩種）、蜂膠液（分酒溶和水溶兩種）、片劑以及外用劑型，請按照說明書標明的劑量和方法服用。需要注意的是，某些人對蜂膠會發生過敏反應，一般在服用3～5天內發生，停用后1～2周癥狀會消失。
蜂花粉是蜜蜂從植物花朵中采集的花粉粒，是工蜂的食物，故又稱為“蜂糧”。蜂花粉中除含有優質蛋白質等豐富的營養素外，還含有豐富的生物活性酶等多種有效成分，包括了孕育生命所需的營養物質，被營養學家和醫學家譽為“純天然的濃縮營養庫”。
蜂花粉又是一種“可以吃的化妝品”，內服、外用均有利于美容。長期服用蜂花粉可調節人體營養平衡，使細胞的生理代謝處于良好狀態。也可通過皮膚直接吸收蜂花粉中的營養成分，達到營養肌膚的美容效果。
現代研究認為，蜂花粉中含有的多種生物活性物質能夠增強人體中樞神經系統的功能，使大腦保持旺盛的活力，能夠增強體力、抗疲勞、抗衰老。還有報道認為，蜂花粉能夠輔助治療前列腺疾病。
蜂花粉可在早飯、晚飯后半小時用溫開水送服，每次5克。對花粉過敏者不可服用蜂花粉。
【關鍵詞】蜂膠；西洋參；調節免疫；抗腫瘤
蜂膠在我國市場出現只有40多年歷史，這是由于中華蜂不產蜂膠，所以從意大利蜂引進我國才產蜂膠。蜂膠在2005年作為中藥材收錄中國藥典，目前國內產品多以單純蜂膠制成的保健品為主，將蜂膠與西洋參配伍進行產品研發報導很少，本文將蜂膠、蜂膠西洋參組合物灌胃肝癌移植瘤小鼠，并采用血清溶血素測定、NK細胞活性測定、ConA誘導的脾淋巴細胞轉化功能測定和腫瘤抑制率測定，觀察其對免疫功能的影響及抗腫瘤作用，期望為蜂膠配伍西洋參的產品研發提供實驗依據，現將結果報告如下：
1實驗動物和檢測條件
實驗動物用ICR種小鼠由浙江省實驗動物中心提供，清潔級，雌性，體重20±2g。飼料由浙江省實驗動物中心提供，執行標準GB14924-1994。檢測環境條件：溫度91-93℃，相對濕度60-65%。動物于試驗前在動物房環境中適應3天
2實驗藥物和劑量設計
2.1 蜂膠:采自養蜂場的原蜂，由杭州天廚蜜源保健品有限公司提供。將蜂膠經乙醇提純，經冷凍干燥制成純蜂膠。純蜂膠與淀粉按2：1混合，加入粉碎機中打成200目蜂膠粉，冷貯備用。
2.2 西洋參：購自吉林省宏久生物科技股份有限公司的西洋參提取物。
2.3 受試藥的配制：將蜂膠粉與西洋參提取物以3：1的比例混合均勻，臨用時用蒸餾水配制成5g/ml、2.5g/ml、1.25g/ml濃度。蜂膠對照組采用蜂膠粉，臨用時用蒸餾水配制成5g/ml濃度。
2.4 實驗設三個蜂膠西洋參劑量組、一個蜂膠對照組和一個蒸餾水對照組。低、中、高三個蜂膠西洋參組劑量分別為0.5、1.0、2.0g/kg體重(相當于人體臨床擬用量的7.5、15和30倍)，蜂膠對照組劑量為蜂膠粉2.0g/kg體重，蒸餾水對照組每日灌胃蒸餾水20ml/kg體重。給藥前24小時以上各組動物均皮下接種HepA細胞(2×107/ml)0.2ml/只。
3實驗方法
3.1小鼠血清溶血素測定(血凝法)：各組灌胃給樣品，每天1次，連續10天。在試驗第6天，每鼠腹腔注射0.2ml2%(V/V)壓積綿羊紅細胞(SRBC)懸液，進行免疫。4天后，取血離心，收集血清，用生理鹽水將血清倍比稀釋，37℃溫箱孵育3小時，觀察血球凝集程度，計算抗體積數。
3.2 NK細胞活性測定（LDH測定法)：各組灌胃給樣品，每天1次，連續10天。在試驗第11天，每鼠無菌取脾，置于盛有適量無菌Hanks液的小平皿中，在200目尼龍網袋內輕輕捻壓，過濾，制成單細胞懸液，計數，用RPMI1640完全培養液調整細胞濃度為5×±1O6個/ml。試驗前24小時將YAC-l細胞(靶細胞)傳代培養，應用前用Hanks液洗3次，用RPMI1640完全培養液調整細胞濃度為l×lO5個/ml。取靶細胞和脾細胞懸液(效應細胞)各1OOul(效靶比50：1)，加入U型96孔培養板中，靶細胞自然釋放孔加靶細胞和培養液各10Oul，靶細胞最大釋放孔加靶細胞和l%NP40各1Ooul。上述各項均設三個復孔，于37℃、5%CO2培養箱中培養4小時，離心，每孔吸取上清1OOul置平底96孔培養板中，同時加入LDH基質液100μl，反應3分鐘，每孔加入1mol/L的HCI30ul，測光密度(OD)值，計算NK細胞活性。
3.3 ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化的測定：各組灌胃給樣品，每天1次，連續10天。動物頸椎脫臼處死，取脾臟，在200目尼龍網袋內輕輕捻壓，過濾，制成脾細胞懸液，用無菌Hanks液洗2次，用RPMI1640完全培養液調整細胞濃度為1×107個/ml，將細胞懸液加入96孔培養板中，每一份脾細胞懸液3孔，每孔0.1ml，每孔再加入含ConA（濃度10ug/ml）的RPMI1640完全培養液0.1ml。培養板置5%CO2，37℃培養72h。培養結束前16h，每孔加入3H-TdR20μl，使其終濃度為3.7×104Bq/ml。用多頭細胞收集器收集細胞于玻璃纖維濾紙上。濾紙片置閃爍液中，用液閃儀測定每分鐘脈沖數（cpm)。結果用三個復孔的平均cpm表示。
3.4 剝離各動物實體瘤，稱重，計算抑瘤率%。
抑瘤率=( 1-給藥組平均瘤重/對照組平均瘤重)×100%
3.5數據處理：采用方差分析。
4實驗結果
4.1 對小鼠血清溶血素影響：結果見表1。與陰性對照組(蒸餾水)比較，蜂膠西洋參中、高二個劑量組能提高小鼠血清溶血素抗體積數水平，差異均有顯著性(P
表1 對荷瘤小鼠血清溶血素影響
注：* P
4.2對小鼠NK細胞活性的影響：結果見表2。與陰性對照組(蒸餾水)比較，蜂膠西洋參中、高二個劑量組均能提高小鼠NK細胞活性，差異均有顯著性(P
表2 對小鼠NK細胞活性的影響
注：* P
4.3 對ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化的影響：結果見表7。蜂膠西洋參中、高劑量組及蜂膠對照組的ConA誘導的脾淋巴細胞轉化值，與陰性對照組(蒸餾水)比較，差異均有顯著性(P
表3對ConA誘導小鼠脾淋巴細胞轉化的影響
注：* P
4.4 對肝癌移植瘤(HepA)的抑制作用：結果見表7。蜂膠及蜂膠西洋參各組對HepA腫瘤的抑制率在10%～18%，但與陰性對照組比較無明顯差異（P＞O.05）。
表4 對HepA荷瘤小鼠瘤體生長的影響
注：與陰性對照組比較無明顯差異（P＞O.05）
5討論
蜂膠是蜜蜂從植物芽孢或樹干上采集的樹脂，混入自身分泌物形成的一種膠狀物質，具有多種保健功能，目前社會上也有人與西洋參一起配伍用來滋補身體。文獻報導蜂膠能夠增強免疫功能低下小鼠的抗體生成細胞功能，提高溶血素含量，增強單核吞噬細胞功能，提示蜂膠有促進和調節機體體液免疫功能的作用，并增加機體吞噬細胞的吞噬作用[1]。也有作者用MTT法、耳腫脹法、Jerne改良玻片法、血凝法、半體內法、乳酸脫氫酶測定法等多種方法，觀察蜂膠提取物對小鼠脾淋巴細胞轉化、遲發型變態反應、血清溶血素、腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞、NK細胞活性狀況，結果蜂膠提取物具有增強小鼠細胞免疫功能和體液免疫功能的作用[2]。西洋參主要具補氣養陰，清熱生津功能[4]。現代藥理研究表明具有抗應激，抗休克和改善心血管系徑統作用有抗應激[5]。蜂膠與西洋參配伍進行免疫功能觀察報導甚少。本文將蜂膠與西洋參配伍成混合粉進行對荷瘤小鼠免疫功能影響的觀察，結果表明蜂膠西洋參以1.0g/kg和2.0g/kg 灌胃荷瘤小鼠可明顯提高小鼠的血清溶血素水平（P
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本實驗采用1,1-二苯基苦基苯肼自由基(DPPH)分光光度法[3,4]測定蜂膠、BHT、蜂膠抗氧化美容霜和市售抗氧化霜的抗氧化活性。進一步證實了蜂膠的抗氧化活性,為蜂膠添加入化妝品中的可行性和優越性奠定基礎。
1材料與儀器
材料:蜂膠1,由湖北荊門蜂農提供;蜂膠2,由福建省神蜂科技開發有限公司提供;市售抗氧化霜;BHT(化學純)由國藥集團化學試劑有限公司;DPPH自由基,購于光純藥工業株式會社;其它試劑皆為國產AR級,試驗用水皆為二次重蒸水。
儀器:WFJ 7200型分光光度計,尤尼柯(上海)儀器有限公司;電子天平BS223S,賽多利斯科學儀器(北京)有限公司;自動雙蒸純水器、水浴鍋、電熱鼓風干燥箱等。
2實驗方法
2.1 兩種蜂膠清除DPPH?自由基能力的比較
蜂膠1、蜂膠2用無水乙醇配置成濃度為0.008g/mL的溶液(參照2009年蜂膠國家標準GB/T 24283-2009);
DPPH溶液:稱取0.0128g加無水乙醇溶解于50mL容量瓶中,定容,搖勻 ,作為儲備液 ( 6. 5×10- 4 mol/ L ) 保存于冰箱中,用時稀釋10倍;
樣品在40℃,75%RH下放置0~4周后,按表1加樣并充分混勻,測定30min后其在517nm波長處的吸光值。取3次測試的平均值計算清除率。
空白A0為4.0mL DPPH溶液加0.2mL樣品溶劑,樣品Ai為4.0mL DPPH溶液加0.2mL樣品溶液,測吸光值。
自由基清除率(%)=[(A空白-A末)/A空白]×100%
2.2 兩種蜂膠與BHT清除DPPH?自由基能力的比較
BHT(2,6-二叔丁基對甲酚)用無水乙醇配置成濃度為0.008g/mL的溶液;
蜂膠1、蜂膠2用無水乙醇配置成濃度為0.008g/mL、0.0008g/mL、0.0004g/mL的溶液。樣品在40℃,75%RH下放置0~4周后,同上一步加樣反應。
2.3 蜂膠抗氧化美容霜與市售抗氧化產品清除DPPH?自由基能力的比較
在40℃,75%RH下放置0~4周后,直接取蜂膠抗氧化美容霜(添加蜂膠1的終濃度為0.008g/mL)和市售抗氧化霜各0.2mL,按表1,分別加入體系中反應,并計算結果。
2.4 數據統計與分析
實驗數據均采用spss軟件進行統計與分析。
3結果與分析
3.1 蜂膠1與蜂膠2清除DPPH?自由基能力的比較
兩種蜂膠對DPPH?自由基的清除作用見圖1。結果表明兩種蜂膠對DPPH?自由基皆有明顯的清除作用,其中蜂膠1的自由基清除活性略大于蜂膠2。隨著在40℃,75%RH下放置時間的延長,兩種蜂膠的清除活性無明顯改變,并都明顯大于BHT。
圖1兩種蜂膠的清除率比較
3.2 不同濃度蜂膠與BHT清除DPPH?自由基能力的比較
如圖2、圖3所示,兩種對DPPH?自由基有明顯的清除作用,且清除率與蜂膠的濃度呈正相關。當稀釋20倍后,蜂膠2的自由基清除活性才略低于BHT,而蜂膠1的自由基清除活性與BHT的自由基清除活性差異不明顯。
圖2蜂膠2與BHT的清除率比較
注:蜂膠2*10為蜂膠2溶液稀釋10倍;蜂膠2*20為蜂膠2溶液稀釋20倍。
圖3蜂膠1與BHT的清除率比較
注:蜂膠1*10為蜂膠1溶液稀釋10倍;蜂膠1*20為蜂膠1溶液稀釋20倍。
3.3 蜂膠抗氧化美容霜與市售抗氧化霜清除DPPH?自由基能力的比較
從圖4可以看出,蜂膠抗氧美容霜清除自由基活性強,達到63.71%;在40℃,75%RH下放置1周后,清除率降低到59.90%,而當儲存2周后,清除率提升到82.59 %,并保持在該水平;市售抗氧化霜的自由基清除活性為4.84 %,當在40℃,75%RH下放置1周后,清除率為3.01 %,放置2周后就不具有自由基清除活性了。
圖4自制蜂膠抗氧化美容霜與市售抗氧化霜的清除率比較
4討論
兩種化妝品的抗氧化活性在40℃,75%RH下放置2周后都有明顯的變化,蜂膠抗氧化美容霜的清除率明顯上升,并保持在較高水平,而市售抗氧化霜的清除自由基能力則完全消失,這可能與它們的乳化狀態發生變化有關。市售抗氧化霜的抗氧化活性很低,可能是因為該產品價格低,抗氧化成分含量少,不代表整個化妝品界,但可以反映出某種社會現象,即化妝品市場的規范性和真實性有待進一步改善。
本實驗中還存在一些問題:市售霜和蜂膠抗氧化美容霜在DPPH反應液中的溶解性不好,一定程度影響結果。但該問題兩產品同時存在,也在一定程度上具有可比性。蜂膠還處于初步研究階段,它成分復雜、藥理活性多樣,各地不同產區差異性大,其化學成分的組成和藥理活性的特點常常有很大差別,因此需要更深入的研究。用DPPH法評價天然抗氧化劑的抗氧化活性,在操作時,一定要注意避光和通風,因為 DPPH溶液為劇毒、易揮發的液體[5]。
隨著市場需求的日益加大,蜂膠的神奇妙效不斷被發現和證實,我們相信,通過科學、嚴格的管理和規劃,是能夠生產出合格、標準、統一的優質蜂膠化妝品的。
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蜂膠，是蜜蜂采集膠源性植物的樹脂，摻和其上腭腺及蠟腺分泌物，經蜜蜂反復加工而成的膠狀物質。蜜蜂將之涂到蜂巢入口和內壁上，以保持巢內相對無菌狀態。蜂膠由于產量低且保健功能顯著，被譽為“紫色黃金”。
“世界蜂膠看巴西。”巴西蜂膠因其產自原始、天然生態環境而備受各國消費者追捧，中國人也經常會托當地工作的朋友購買蜂膠。
綠蜂膠除了蜂膠普遍具有的保健功能外，在抗菌性和提高免疫力方面均優于其他品種。因此，出產綠蜂膠的季節是吉列爾梅和太太妮維雅最忙碌的時間。他們拉亞集團的“蜜蜂家族”系列產品是巴西綠蜂膠知名品牌，多項指標居于行業前列。
記者跟隨吉列爾梅來到米納斯吉拉斯州福米加市附近的叢林中，看到每個蜂箱里大約有2萬至3萬只蜜蜂。這些蜂箱相當于自然界的蜂巢，蜜蜂們在蜂箱中生活、釀蜜。如此多的蜜蜂在如此狹小的空間內生活，卻能夠不感染任何病毒，秘密就在于蜂箱與外部相通的地方被一層蜂膠封住，而這層蜂膠具有超強的抗菌性。
吉列爾梅告訴記者，蜂膠從顏色看，綠色比棕色好，棕色比黑色好。雖然巴西全國各地都有可能出產蜂膠，但出產綠蜂膠的地區少之又少。這是因為綠蜂膠必須到生長著具有超強抗氧化作用的迷迭香和酒神菊的地區采集，并且這一地區沒有污染。這就是為什么人們一定要到海拔700至1500米的深山中采集蜂膠的原因。
除了植被沒有被污染外，蜂種也非常重要。從事蜂膠生產25年的妮維雅強調，“非常重要的一點是巴西蜜蜂的品種”，它們是歐洲蜂和非洲殺人蜂的雜交后代。與體格較弱的歐洲蜂相比，雜交產物巴西殺人蜂不僅產膠多，而且體格壯，具有很強的免疫力，是世界上唯一不感染疾病的蜂種。因此蜂農不需要給蜜蜂施用抗菌素來預防蜂疫。而且產膠的是工蜂，因此蜂膠里也沒有任何激素。
即使是產膠能力強的巴西殺人蜂，每個月一個2萬至3萬只蜜蜂的蜂箱出產蜂膠也僅一公斤左右。“蜜蜂家族”采集蜂膠的這個養蜂基地共有5000個蜂箱，年產約1.5噸蜂膠。整個米納斯吉拉斯州約有4萬個蜂箱。
氣候對蜂膠的產量也有影響，如果連續下雨，蜂膠就會非常軟，無法收割。基地負責人馬特烏斯說，2016年有一個月連續下雨，造成產量大幅下降。
在養蜂基地，人們在上下蜂箱間設立間隙，誘使蜜蜂采集加工蜂膠，來封堵蜂箱間的縫隙。記者看到，有些蜂箱的縫隙已被蜂膠填滿。這時候，蜂農可以用刀小心地將蜂膠割下來。大概一周時間，勤勞的小蜜蜂們再次將縫隙用蜂膠封起來。然后，蜂農再割一次。當然，這樣的重復操作最多只能持續3個多月。在一年中剩余的9個月中，這些蜜蜂的任務就是生產蜂蜜了。
妮維雅介紹，割下來的蜂膠會被送到工廠進行分揀和清潔。人們剔除蜂膠在被采集過程中沾上的木屑，然后將之冷藏。在提純過程中，需要嚴格控制氧化時間，采用超臨界萃取工藝，使蜂膠中的有效成分最大限度析出，溶解液達到最大程度飽和。
拉亞集團的蜂膠很多都出口到日本、韓國、馬來西亞等亞洲國家，近年來開始開拓歐洲和北美市場。
優勢一、經典配方:中科蜂膠養生寶是按照人體保健的需求針對當代嚴重威脅人體健康的病痛,采用現代生物工程的離析組合技術,在分子水平上對具有綜合調理作用的蜂膠和有延緩衰老效用的蜂王漿凍干粉以及被稱作營養寶庫的蜂花粉做了優化提取和重新配伍而研制出來的新一代蜂膠制品――每100克中含總黃酮4300毫克,10-羥基-α-癸烯酸1100毫克,是蜂產品所有優勢成分的完美結合,其比例增之一分嫌多,減之一分不及,是科學家專為中老年人開出的一劑健康處方,能充分激發各種蜂產品成分的潛在效用,起到立體式全方位的護衛人體健康的作用。
優勢二、效果卓著:中科蜂膠養生寶集蜂產品的優勢成分于一身,濃縮了蜂產品的所有生物活性成分,使其作用更強、見效更快、效果更好。中科蜂膠養生寶的神奇效果引起了海內外科學家的關注,許多專家還紛紛訂購進行研究,希望能破解中科蜂膠養生寶的經典配方。更有外國富商要重金購買這一經典配方,都被婉言謝絕了,因為中科蜂膠養生寶是極有價值的民族品牌。
優勢三、科技結晶:中科蜂膠養生寶是國家九五重點科技攻關項目的科研成果,是中科院兩位院士、六位教授、三十九位高級工程師多年刻苦專研的結晶,是當今最新科技的完美杰作。
優勢四、原料純凈:中科蜂膠養生寶的膠原一直采用的是最優質的蜜蜂種群,其膠源位于高緯度無污染的黃山深山區,這就從源頭上保證了中科蜂膠養生寶的原生態和優質性。
優勢五、工藝超凡:中科蜂膠養生寶采用領先國際的脫鉛工藝,使其無雜質殘留,食用起來更安全。
優勢六、專利保護:中科蜂膠養生寶其獨有的配方不僅通過國家衛生部的認證,而且獲得國家專利,受法律保護。
中科蜂膠養生寶上市11年來,以其獨有的六大優勢和實實在在的效果得到了廣大消費者的推崇和信賴,尤其是這十種人對它更是情有獨鐘:第一種心腦血管有問題的人:第二種血糖有問題的人:第三種免疫力低下的人;第三種長期胃腸不適的人;第四種有肝病的人;第五種有支氣管哮喘的人:第七種有更年期障礙的人:第八種自我保健意識強的人;第九種需要送禮的人;第十種追求實惠的人。
【摘要】 目的 觀察蜂膠總黃酮對D半乳糖誘導衰老模型小鼠學習記憶的影響，并對其作用機制進行了探討。方法 小鼠頸背部皮下注射D半乳糖42 d，制備衰老模型。通過小鼠學習記憶能力、腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)、丙二醛(MDA)、脂褐素(LF)水平的測定，評價蜂膠總黃酮的抗衰老作用。結果 與空白對照組相比，D半乳糖（150 g/kg，sc，42 d）使小鼠學習記憶能力降低，腦組織中SOD、GSHPx活性下降，MDA、LF含量增加，而蜂膠總黃酮30 mg/kg、60 mg/kg和90 mg/kg三個劑量組對上述病理變化具有不同程度改善作用。結論 蜂膠總黃酮能改善D半乳糖誘導衰老小鼠學習記憶功能障礙，其機制可能是抗氧化調節自由基代謝。
【關鍵詞】 蜂膠；黃酮；學習記憶；脂褐素；衰老
蜂膠是蜜蜂從植物芽孢或樹干采集的蜂蜜，混入蜜蜂上頜腺分泌物和蜂蠟后加工制成的芳香味的膠狀固體物質。蜂膠富含多種具有藥用價值的活性成分，其中主要是黃酮類化合物，研究發現蜂膠黃酮具有抗菌、抗病毒、抗炎癥、抗腫瘤、免疫調節、清除自由基等生物學活性〔1，2〕 。 而蜂膠黃酮對學習記憶的影響少見報道。本課題組前期研究發現蜂膠醇提物對各種學習記憶障礙模型小鼠具有明顯保護作用〔3〕 。本文在此基礎上，采用超聲法提取蜂膠總黃酮，觀察了其對D半乳糖誘導衰老模型小鼠學習記憶功能的影響，并從抗氧化角度對其作用機制進行了初步探討，以期為蜂膠的抗衰老作用提供實驗依據。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 蜂膠原膠 由山東省實驗種蜂廠提供。參照文獻〔4〕，超生法提取蜂膠總黃酮，臨用前0.15%吐溫80溶解，配成所需濃度備用。參照文獻〔5〕，以蘆丁為標準品，用比色法測定總黃酮含量。
1.1.2 昆明種小鼠 體重18～22 g，由泰山醫學院實驗動物中心提供，合格證號：魯動質字020103。
1.1.3 材料及儀器 D半乳糖，Amresco生產，上海貝基生物技術有限公司分裝，臨用前用生理鹽水配制合適濃度； 超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）試劑盒、 丙二醛（MDA）試劑盒、脂褐素(LF)試劑盒、考馬斯亮藍測定試劑盒，購自南京建成生物工程研究所；蘆丁標準品，購自中國藥品生物制品檢定所。KQ600DB型數控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司生產；Y型迷宮刺激器，安徽省淮北正華生物儀器設備有限公司生產；紫外分光光度計，上海棱光技術有限公司生產；RF5301PC熒光分光光度計，日本島津生產。
1.2 方法
1.2.1 動物篩選、分組、給藥及模型的制備〔6〕
取2月齡昆明種小鼠放入Y型迷宮箱中適應1～2 min，給予適當電擊，至其對3臂均探索進入為止，選擇活躍，對電擊反應較敏感的小鼠，過于敏感和遲鈍小鼠被淘汰。篩選80只小鼠隨機分為5組，每組16只(雌雄各半)，對照組，D半乳糖衰老模型組，均灌胃等體積生理鹽水，蜂膠總黃酮低、中、高濃度組，分別以30、60、90 mg/kg 3個劑量進行灌胃，給藥6 w。灌胃同時除生理鹽水對照組外，其余各組小鼠每只每日頸背部皮下注射D半乳糖150 mg/kg 1次，連續6 w，制備小鼠衰老模型。末次給藥后，進行Y型迷宮試驗。
1.2.2 Y型迷宮試驗〔7〕
采用Y型迷宮法，迷宮共分為三個互通的臂。實驗測試時，以A為起步區，B為安全區，C為危險區。工作電壓20～30 V。小鼠在起步區受到電擊后，一次性跑入安全區為正確，否則為錯誤，即為一次訓練。下一次訓練以B為起步區，C為安全區，A為危險區，依次往復。共訓練33次，其中前3次作為小鼠適應環境不進入統計，記錄后30次的錯誤次數，為學習成績。24 h后，用同樣的方法測試，為記憶成績。
1.2.3 腦組織生化指標的測定 測試后的小鼠快速斷頭處死，隨機每組選取8只，取其腦組織制成10%水相腦勻漿，測定脂褐素含量；另外8只取其腦組織用生理鹽水制成10%勻漿，3 000 r/min低溫離心10 min，取上清液測定SOD、GSHPx活性及MDA含量。考馬斯亮藍作蛋白定量。
1.3 統計學處理 數據用x±s表示，使用SPSS14.0軟件進行統計分析，組間顯著性檢驗采用單因素方差分析。
2 結果
2.1 蜂膠總黃酮對衰老模型小鼠學習記憶功能的影響 與對照組相比，模型組小鼠學習記憶功能明顯衰退，表現為學習實驗和記憶實驗的錯誤次數均明顯增多（P＜0.01），說明建模成功。與衰老模型組相比，蜂膠總黃酮三個劑量組能明顯降低小鼠的錯誤次數（P＜0.01，P＜0.05），說明蜂膠總黃酮能改善衰老小鼠的學習記憶。見表1。
2.2 蜂膠總黃酮對衰老模型小鼠腦組織SOD、GSHPx活性及MDA、LF含量的影響 與對照組相比，模型組SOD、GSHPx活性明顯降低，MDA、LF含量明顯升高（P＜0.01或P＜0.05），符合小鼠衰老規律。與衰老模型組相比，蜂膠總黃酮中、高劑量組SOD、GSHPx活性顯著提高（P＜0.01或P＜0.05），而MDA、LF含量蜂膠總黃酮三個劑量組都明顯下降（P＜0.01）。說明蜂膠總黃酮能提高衰老小鼠腦組織中SOD、GSHPx活性，降低MDA、LF含量，減輕模型鼠的過氧化損傷。見表2。
表1 蜂膠總黃酮對衰老小鼠學習記憶功能的影響（略）
與模型組比較：1)P＜0.01，2)P＜0.05
表2 蜂膠黃總酮對衰老小鼠腦組織SOD、GSHPx、 MDA、LF水平的影響 （略）
與模型組比較：1)P＜0.01，2)P＜0.05
3 討論
D半乳糖致衰老模型是基于衰老的代謝學說而復制的一種衰老模型，其衰老反應接近或相當于自然衰老。研究表明〔8〕D半乳糖造成的衰老模型可使實驗動物學習記憶能力明顯下降，本研究結果也發現，皮下注射D半乳糖6 w后，小鼠學習實驗與記憶實驗錯誤次數明顯增多，學習記憶能力下降。而在D半乳糖造模的同時給以蜂膠總黃酮，可明顯改善小鼠的學習記憶能力。提示蜂膠總黃酮具有益智的功效，這與先前的實驗結果一致〔3〕 。
D半乳糖致衰老模型具有與自然衰老相似的自由基代謝紊亂特征〔9〕 。隨年齡增長，機體抗氧化系統物質合成、活性均下降，清除氧自由基的能力下降，導致自由基堆積，產生大量代謝產物MDA，對機體產生損害，加速衰老。機體內存在的清除自由基防御系統包括SOD、GSHPX、過氧化氫酶(CAT)等抗氧化酶，及維生素A、維生素C 和維生素E 等抗氧化物質〔10〕 。SOD能促使超氧化物陰離子自由基變為過氧化氫和氧離子，防止氧自由基破壞組織和細胞；GSH能特異性催化谷胱甘肽對過氧化氫的還原反應，起到保護細胞膜的作用；MDA是衡量機體內自由基代謝的敏感指標，客觀反映體內自由基的水平；自由基作用于多不飽和脂肪酸產生脂質過氧化物，后者產生醛基和羰基，導致大分子交聯，最終形成LF，隨年齡的增長，LF越積越多，因此機體LF的含量可以反映衰老〔11～13〕 。本研究發現，給予D半乳糖后，小鼠腦組織SOD、GSH活性下降，而過氧化產物MDA、LF含量明顯增高，這與文獻報道一致〔14〕，說明造模成功。而給予D半乳糖同時給以蜂膠總黃酮可使SOD、GSH活性顯著提高，MDA、LF的含量明顯下降，這提示，蜂膠總黃酮對抗D半乳糖誘導衰老的作用機制是通過阻斷自由基鏈反應的各個環節，從而對抗自由基對中樞神經系統的損傷，有效改善D半乳糖誘導的學習記憶障礙。
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我今年82歲，已進入耄耋之年，經過20多年的養生保健，長期“陪伴”我的慢性支氣管炎、慢性結腸炎、慢性膽囊炎都已先后痊愈，近幾年痔瘡也未復發過，20多年來未因重病住院，生活完全自理。我現在精力充沛，耳聰目明，思維清晰，仍能筆耕撰稿。除保持樂觀的心態和遠離不良嗜好外，主要采取以下方法：
一、素食為主 平衡膳食
我過去患有慢性結腸炎，如吃瘦肉較多便會誘發，更不宜吃油膩食物。1995年我在體檢時發現血脂超標，這是心血管疾病的前兆，絕不可掉以輕心，而平衡膳食是配合治療高血脂的重要環節。于是，我每天定量食蔬菜400～500克，葷食是豬瘦肉、有鱗魚等120～150克，植物油約20克，食鹽適量。長期的清淡飲食，使我保持了旺盛的食欲。而米面等主食控制在350～400克，食勿過量，每頓八成飽，尤其是晚餐要少吃。經常吃豆制品、豆類菜、瓜類、葉菜類、洋蔥、胡蘿卜、蘑菇、西紅柿和紫菜等。盡量不吃那些高膽固醇、高脂肪的食品，如動物內臟、魚子、皮蛋等。每天吃些水果，適當多飲茶水，保持腸道通暢。
二、常食佳品――黑木耳
經常吃黑木耳會稀釋血液，不易患腦血栓、冠心病等。我于2003年起長期堅持食用黑木耳，受益不小。黑木耳以春季的為最好，膨脹率大，朵朵肥厚，雜質少。食法很簡單，先加冷水將其發開，棄雜洗凈，然后棄水用火蒸熟，冷后放入冰箱冷藏，每天就餐前在菜里或面食中加入一些。日需干黑木耳5～8克。
三、又服珍品――蜂膠
我長期從事養蜂工作，對蜂產品的醫療保健作用有所了解，因而聯想到被專家譽為“紫色黃金”和“血管清道夫”的蜂膠。蜂膠的主要成分為黃酮類化合物，有凈化血液、軟化血管的作用，能降低血脂、血壓、血糖和血黏度，是抗癌的重要輔助品，也是天然的抗氧化劑。于是我著手用蜂膠末、食用酒精(比例為1:4，經常搖動促其溶解)自制蜂膠酊。每晚臨睡前用注射器計量，加溫開水稀釋后口服，每天服純蜂膠約1克。美中不足的是味道不好，口服有些難度，再加上自制蜂膠酊經多次提取上層酊汁后，很難計算含蜂膠的量。2006年起我改服蜂膠片，每天清晨和晚上睡前空腹共服8片，比自制蜂膠酊要好。
四、有氧運動 適度鍛煉
生命在于運動。對老年人來說，生命在于適當運動，做到動靜結合，勞逸結合。適度鍛煉，可以改善老年人的生活質量和自理能力。因此，我每天一般在傍晚散步40分鐘以上。在散步同時做深呼吸運動，不斷吐故納新。這種有氧運動對身體十分有利。平時生活環境也注意空氣流通，這樣可以增加血液中的氧氣，清醒頭腦，煥發精神。另外，我還飼養了少量蜜蜂，借以陶冶情操，勞動身心，增加戶外運動量，使精神有所寄托。此外，還做些力所能及的家務勞動。現在對我來說，健康長壽已經初步獲得成效。今后要不斷堅持，相信暮年晚景將會更加幸福美滿。
